二氢杨梅素通过调节Nrf2信号通路缓解LPS诱导的鸡肝损伤

目录

声明

摘要

1前言

1．1LPS的研究概况

1．1．1LPS的结构

1．1．2LPS的功能

1．1．3LPS与炎症反应

1．1．4LPS与氧化损伤

1．2Nrf2信号通路的研究进展

1．2．1氧化应激关键转录因子Nrf2的结构和功能

1．2．2“Nrf2的抑制剂”keap1的功能

1．2．3Nrf2信号通路的激活方式

1．2．4Nrf2信号通路的激活剂

1．2．5Nrf2信号通路的激活对下游靶基因的调节

1．3DHM的研究进展

1．3．1DHM的概述

1．3．2DHM的化学特性

1．3．3DHM的药理作用

1．4研究目的与意义

2材料与方法

2．1材料

2．1．1试验动物

2．1．2主要仪器设备

2．1．3主要试剂

2．1．4主要试剂配制

2．2试验方法

2．2．1DHM对LPS诱导鸡肝损伤的保护作用

2．2．2DHM对LPS诱导鸡原代肝细胞损伤的保护作用

2．2．3DHM通过Nrf2信号通路干预LPS诱导肝细胞损伤的作用研究

2．2．4AST、ALT和LDH活性的检测

2．2．5肝脏中抗氧化酶活性的检测

2．2．6MTT法检测细胞活力

2．2．7ROS含量的检测

2．2．8总RNA提取与实时荧光定量PCR检测

2．2．9Western blot检测蛋白表达水平

2．2．10数据计算及统计分析

3结果与分析

3．1DHM对鸡肝损伤的保护作用

3．1．1DHM对鸡肝损伤中ALT、AST、LDH活性的影响

3．1．2DHM对鸡肝损伤中抗氧化能力的影响

3．1．3DHM对鸡肝损伤中Nrf2信号通路相关因子mRNA表达的影响

3．1．4DHM对鸡肝损伤中Nrf2信号通路相关因子蛋白表达的影响

3．2鸡原代肝细胞分离培养与鉴定

3．2．1鸡原代肝细胞的分离培养

3．2．2糖原染色鉴定鸡原代肝细胞

3．3DHM对鸡原代肝细胞损伤的保护作用

3．3．1DHM对肝细胞活力的影响

3．3．2DHM对肝细胞损伤中LDH活性的影响

3．3．3DHM对肝细胞损伤中抗氧化酶活性的影响

3．3．4DHM对肝细胞损伤中ROS含量的影响

3．3．5DHM对肝细胞损伤中Nrf2信号通路相关因子mRNA表达的影响

3．3．6DHM对对细胞损伤中Nrf2信号通路相关因子蛋白表达的影响

3．4DHM通过Nrf2信号通路干预肝细胞损伤的作用研究

3．4．1Nrf2激活剂TBHQ最适浓度的筛选

3．4．2DHM通过Nrf2信号通路对肝细胞损伤的影响

4讨论

4．1LPS诱导鸡肝损伤和原代肝细胞损伤

4．2DHM对LPS诱导的肝损伤的保护作用

4．3DHM能提高肝损伤中抗氧化酶活性

4．4DHM通过激活Nrf2信号通路干预肝细胞损伤

4．4．1DHM对Nrf2信号通路相关因子表达的影响

4．4．2DHM通过Nrf2的活化干预肝细胞损伤

5结论

致谢

参考文献

攻读硕士学位期间发表的学术论文