基于Nrf2信号通路和胆汁酸代谢网络分析二氢杨梅素对急性肝损伤的保护作用

摘要

目的：研究目的本研究通过中药配伍探讨DMY对TP所致ICR小鼠急性肝损伤的减毒作用及相关保护机制. 方法：雷公藤甲素模型组腹腔注射1.0mg/kg建立小鼠急性肝损伤模型.建立LC-MS/MS法测定各组小鼠肝脏组织中的16种胆汁酸含量,通过检测血清指标ALT、AST和ALP的活性,肝生化指标GSH、GSH-PX、SOD、CAT和MDA的含量,HE染色观察肝组织的病理改变,以及采用Western blot检测肝组织中Nrf2的表达,实时定量PCR检测肝组织中的MRP2、GCLC、HO-1、NQO1mRNA表达水平. 结果：采用SIMCA-P12.0软件的主成分分析(PCA)和偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)对胆汁酸结果进行数据处理,结合SPSS17.0统计学软件进行分析,TLCA、HDCA、GCA和GLCA四种胆汁酸为DMY干预TP后下调这四种胆汁酸含量起到保护作用的生物标志物.同时与TP中毒模型组比较,低剂量、高剂量的DMY保护组(144.4mg/kg和722.2mg/kg)血清ALT、AST和ALP活性明显降低,肝组织中的GSH、GSH-PX、SOD和CAT明显升高,而MDA明显下降,组间比较具有显著性差异,肝组织病理改变也明显减轻.此外DMY保护组能显著诱导肝组织中的Nrf2转位入核,其下游靶基因表达水平也显著升高. 结论：DMY对TP所致的急性肝损伤有保护作用,其机制与激活Nrf2通路减轻TP所致急性肝损伤的氧化应激作用有关.