miR-451a、miR-210-3p在低氧下K562细胞向红系分化过程中作用机制的研究

目录

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中英文对照

第1章 前言

第2章 材料与方法

2.1 材料

2.1.1 实验材料

2.1.2 主要试剂

2.1.3 qRT-PCR引物

2.1.4 慢病毒构建序列

2.1.5 主要试剂配制

2.1.6 主要仪器设备

2.2 实验方法

2.2.1 细胞系的培养

2.2.2 细胞系的诱导

2.2.3 实验分组

2.2.4 联苯胺染色

2.2.5 MTS检测细胞增殖情况

2.2.6 流式细胞仪检测细胞周期变化情况

2.2.7RNA Real-timePCR

2.2.8miRNA Real-time PCR

2.2.9 Western blot检测蛋白质的表达

2.2.10 双荧光素酶报告法

2.2.11 慢病毒转染

2.2.12 靶基因预测

2.2.13 统计方法

第3章 实验结果

3.1 氧浓度的筛选

3.1.1 不同氧浓度对分化的影响

3.1.2 不同氧浓度对增殖的影响

3.2 低氧下GATA-1表达变化的检测

3.3 低氧下K562红系分化模型中miR-451a及miR-210-3p表达的检测

3.4 K562细胞病毒转染效率的检测

3.5 过表达GATA-1后红系分化情况的检测

3.6 GATA-1对miR-451a及miR-210-3p表达情况影响的检测

3.7 miR-451a对红系分化影响的检测

3.8 miR-451a参与红系分化的可能调控机制

3.9 GATA-1与miR-210-3p结合位点的检测

3.10 miR-210-3p对红系分化影响的检测

3.10.1 过表达miR-210-3p对红系分化的影响

3.10.2 抑制miR-210-3p对红系分化的影响

3.11 miR-210-3p参与红系分化的可能调控机制

3.12 Smad2对红系分化情况影响的检测

第4章 讨论

第5章 结论

参考文献

综述:GATA-1参与红系分化调控的分子机制

致谢

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