FABP4与三叶苷拮抗脂肪细胞炎症反应的相关性研究

目录

声明

1 绪论

1.1 慢性炎症的发病机制

(1) 脂肪细胞膨大

(2) 脂肪组织局部缺氧

(3) 内质网应激

(4) 巨噬细胞浸润

1.2 三叶苷的研究进展

1.2.1 三叶苷的理化性质

1.2.2 三叶苷与糖尿病

1.2.3 三叶苷与HIV

1.2.4 三叶苷与炎症

1.3 FABP4的研究进展

1.3.1 FABP4的结构与功能

1.3.2 FABP4缺陷与代谢性疾病

1.4 本文的立论依据及研究内容

2 肥胖模型中差异基因筛选

2.1 前言

2.2 实验材料

2.2.1 生信分析数据库

2.3 实验方法

2.4 实验结果

2.4.1 肥胖与正常人群脂肪、肝脏、肌肉组织中差异基因筛选

2.4.2 小鼠巨噬细胞中FABP4基因表达情况

2.5 讨论

3 三叶苷对脂肪细胞炎症模型中FABP4表达的影响

3.1 前言

3.2 实验材料

3.2.1 实验动物

3.2.2 实验细胞系

3.2.3 常用试剂配制

3.2.4 主要试剂

3.2.5 主要仪器

3.3 实验方法

3.3.1 3T3-L1细胞的培养

3.3.2 3T3-L1细胞诱导分化

3.3.3 3T3-L1细胞油红染色

3.3.4 小鼠脂肪组织蛋白提取

3.3.5 脂肪细胞蛋白提取

3.3.6 蛋白浓度检测

3.3.7 蛋白免疫印迹分析

3.3.8 组织和细胞总RNA的提取

3.3.9 RNA的逆转录和qRT-PCR反应

3.3.10 qRT-PCR反应

3.3.11 FABP4基因干扰

3.3.12 数据统计分析

3.4 实验结果

3.4.1 三叶苷对ob/ob小鼠炎症因子TNF-α和IL-6的影响

3.4.2 三叶苷对ob/ob小鼠FABP4基因表达的影响

3.4.3 三叶苷对LPS诱导的3T3-L1脂肪细胞中炎症因子水平的影响

3.4.4 三叶苷对LPS诱导的3T3-L1脂肪细胞中FABP4表达的影响

3.4.5 FABP4基因干扰对三叶苷调节炎症因子的影响

3.5 讨论

4 三叶苷调节FABP4表达的分子机制

4.1 前言

4.2 实验材料

4.2.1 实验细胞系

4.2.2 常用溶液配置

4.2.3 主要试剂

4.3 实验方法

4.3.1与FABP4存在相互作用的miRNA筛选

4.3.2 miRNA 第一链cDNA合成 (Poly A加尾法)

4.3.3 miRNA 抑制剂 (以转染miR-375-3p，六孔板为例)

4.3.4 细胞转染

4.3.5 数据统计分析

4.4 实验结果

4.4.1调控FABP4的miRNA筛选

4.4.2 三叶苷在体内外对miRNAs表达的影响

4.4.3 miRNA抑制剂对FABP4表达的影响

4.5 讨论

5 结论与展望

5.1 结论

5.2 展望

致谢

参考文献

个人简历、在学期间发表的学术论文及取得的研究成果