香芹酚乙酸酯通过Nrf2信号分子缓解脑缺血再灌注诱导氧化应激损伤

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缩略词简表 （Abbreviations）

第一章绪 论

1.1 缺血性脑卒中、Nrf2信号通路与香芹酚乙酸酯

1.1.1 缺血性脑卒中与氧化应激

1.1.2 Nrf2信号通路与缺血性脑卒中

1.1.3 自由基清除剂

1.1.4 香芹酚乙酸酯与香芹酚

1.2 研究目的

1.3 研究方案

1.4 预期目标

第二章香芹酚乙酸酯具有减缓脑缺血再灌注损伤的作用

2.1 引言

2.2 实验材料与设备

2.2.1实验动物

2.2.2 实验试剂

2.2.3 实验仪器

2.2.4 溶液配制

2.3 实验方法

2.3.1 SD大鼠的饲养

2.3.2 MCAO模型的建立

2.3.3神经行为学评分

2.3.5 缺血病灶TTC染色

2.3.6 HE染色与Nissl染色

2.3.7 脑组织的ROS含量的检测

2.3.8 脑组织的丙二醛（MDA）含量的检测

2.3.9 脑组织的超氧化物歧化酶（SOD）活性的检测

2.3.10 蛋白含量的测定（BCA法）

2.3.11 免疫组织化学与免疫荧光测定Nrf2的表达量

2.3.12 Western blot分析Nrf2的表达量

2.3.13 实验数据统计处理

2.4 实验结果

2.4.1 SD大鼠脑缺血再灌注24 h后的神经行为学评分

2.4.2 TTC染色测定大脑梗死体积

2.4.3 脑组织的HE染色形态学检测

2.4.4 脑组织的Nissl染色形态学检测

2.4.5 脑组织内ROS的含量

2.4.6 脑组织内MDA的含量

2.4.7 脑组织内超氧化物歧化酶SOD的活性

2.4.8 免疫组织化学染色观察脑组织Nrf2表达情况

2.4.9 免疫荧光观察脑组织的Nrf2表达情况

2.4.10 Western blot 分析脑组织的Nrf2表达情况

2.5 本章小结与讨论

第三章香芹酚乙酸酯具有减缓细胞氧化应激损伤的作用

3.1 引言

3.2 实验材料与设备

3.2.1 实验细胞

3.2.2 实验试剂

3.2.3 实验仪器

3.2.4 实验试剂配制

3.3 实验方法

3.3.1 细胞培养

3.3.2 MTT法检测PC12细胞活力

3.3.3 Hoechst33342染色观察细胞凋亡

3.3.4 TUNEL染色测定细胞凋亡

3.3.5 PC12细胞内活性氧簇（ROS）含量的检测

3.3.6 PC12细胞内丙二醛（MDA）含量的检测

3.3.7 PC12细胞内超氧化物歧化酶（SOD）活性的检测

3.3.8 Western bolt 分析PC12细胞Nrf2的表达量

3.4 实验结果

3.4.1 PC12细胞氧化应激模型的建立

3.4.2 ED对H2O2诱导的PC12细胞损伤的保护作用

3.4.3 CA对H2O2诱导的PC12细胞损伤的保护作用

3.4.4 Hoechst 33342染色观察PC12细胞的细胞凋亡程度

3.4.5 TUNEL染色观察PC12细胞的细胞凋亡程度

3.4.6 PC12细胞活性氧（ROS）的含量

3.4.7 PC12细胞丙二醛（MDA）的含量

3.4.8 PC12细胞超氧化物歧化酶（SOD）的活性

3.4.9 Western blot分析Nrf2的表达情况

3.4 本章小结与讨论

第四章香芹酚乙酸酯的保护作用与Nrf2 信号分子的关系

4.1 引言

4.2实验材料与设备

4.3 实验方法

4.3.1 Nrf2基因下调PC12细胞株的构建

4.3.2 MTT法检测NC/KD细胞活力

4.3.3 Hoechst33342染色观察细胞凋亡

4.3.4 TUNEL染色测定细胞凋亡

4.3.5 NC/KD细胞内活性氧簇(ROS)含量的检测

4.3.6 NC/KD细胞内丙二醛(MDA)含量的检测

4.3.7 NC/KD 细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性的检测

4.4 实验结果

4.4.1 Western blot 验证Nrf2基因下调的PC12细胞株

4.4.2 CA对H2O2诱导的NC和KD细胞的损伤的保护作用

4.4.3 Hoechst 33342染色观察NC和KD细胞的细胞凋亡程度

4.4.4 TUNEL染色观察NC和KD细胞的细胞凋亡程度

4.4.5 NC和KD细胞内ROS的含量

4.4.6 NC和KD细胞内MDA的含量

4.4.7 NC和KD细胞内SOD的含量

4.5 本章小结与讨论

第五章结论与展望

5.1 总结与展望

参考文献

致 谢

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