VKH患者血浆外泌体功能及外泌体中miRNA表达谱的差异性分析

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缩略语/符号说明

前言

研究现状、成果

研究目的、方法

一、外泌体的分离与鉴定

1.1对象和方法

1.1.1实验试剂

1.1.2主要器材

1.1.3血液样本的收集

1.1.4血浆的分离和保存

1.1.5 外泌体的分离纯化

1.1.6 外泌体的鉴定

1.2结果

1.2.1透射电子显微镜结果

1.2.2 Western Blot 结果

1.2.3 纳米粒度分析仪结果

1.3讨论

1.3.1外泌体的分离方法

1.3.2 外泌体的鉴定方法

1.4小结

二、miRNA芯片检测

2.1对象和方法

2.1.1实验试剂

2.1.2主要器材

2.1.3 从外泌体中提取 miRNAs

2.1.4 miRNA芯片分析

2.1.5 筛选差异表达的 miRNAs

2.1.6 差异表达miRNAs的靶基因预测

2.1.7 差异表达miRNAs的GO分析

2.1.8 筛选差异表达 miRNAs的pathway分析

2.2 结果

2.2.1 进行miRNA 芯片的患者基本信息

2.2.2 miRNA芯片结果

2.2.3 差异表达miRNAs的GO分析

2.2.4 差异表达miRNAs的KEGG分析

2.3讨论

2.3.1差异表达的miRNAs在疾病中的研究

2.3.2差异表达miRNAs相关的通路分析

2.4小结

三、qRT-PCR验证

3.1对象和方法

3.1.1实验试剂

3.1.2主要器材

3.1.3 提取miRNAs

3.1.4 细胞和组织提取总 RNA

3.1.5 miRNA逆转录为 cDNA

3.1.6 总RNA逆转录为 cDNA

3.1.7 qRT-PCR

2.1.8 统计学分析

3.2 结果

3.2.1 进行qRT-PCR 验证的患者基本信息

3.2.2 qRT-PCR验证结果

3.2.3 hsa-miR-423-3p靶基因预测

3.3讨论

3.4小结

四、外泌体对CD4+T淋巴细胞增殖实验的影响

4.1对象和方法

4.1.1实验试剂

4.1.2主要器材

4.1.3 从全血组织中分离外周血单核细胞

4.1.4 从外周血单核淋巴细胞中分离 CD4+T 细胞

4.1.5 CFSE染色

4.1.6 刺激活化T 淋巴细胞

4.1.7 T细胞增殖实验

4.1.8 流式细胞仪测 CD4+T细胞的增殖

4.1.9 统计学分析

4.2 结果

4.2.1 磁珠分选试剂盒分选 CD4+T淋巴细胞

4.2.2 CFSE测细胞增殖

4.2.3 VKH患者血浆来源的外泌体可以抑制自体CD4+T淋巴细胞的增殖

4.3讨论

4.4小结

结论

参考文献

综述:非编码RNA与葡萄膜炎的研究进展

综述参考文献

致谢

个人简历