显微镜下多血管炎患者血浆外泌体中差异表达的miRNAs及其功能分析

摘要

目的:探究显微镜下多血管炎(MPA)患者血浆外泌体中差异表达的miRNAs及其功能.方法:超速离心分离纯化MPA患者及健康志愿者血浆外泌体,透射电镜和Western blot法进行鉴定;miRNeasy Micro Kit提取外泌体总RNA;illumi-na HiSeqTM2500MiSeq高通量测序检测miRNAs表达谱;生物信息学分析2组差异表达的miRNAs并预测其靶基因及靶基因潜在功能.结果:超速离心获得的微囊泡直径为30～100 nm,表达蛋白CD63和TSG101.高通量测序分析显示,2组显著差异表达miRNAs共32个,其中12个表达上调,20个表达下调.GO富集分析显示差异表达的miRNAs靶基因生物学过程方面主要富集于细胞过程,细胞组分方面主要富集于细胞内和胞质,分子功能方面主要富集于蛋白结合.KEGG富集分析显示差异表达的miRNAs可显著富集于代谢相关信号通路、MAPK信号通路及TLR信号通路等.结论:MPA患者血浆外泌体miRNAs表达谱与健康志愿者相比具有显著差异,推测差异表达的miRNAs在MPA代谢、炎症和免疫调节方面发挥作用.