TPA通过增加脑缺血后周细胞炎症反应引起BBB破坏

目录

声明

缩略语/符号说明

前言

研究现状、成果

研究目的、方法

1.对象和方法

1.1实验动物、细胞

1.2实验仪器

1.3实验试剂

1.4实验方法

1.4.1 MCAO模型

1.4.2脑水肿的测量

1.4.3透射电镜观察BBB超微结构

1.4.4细胞培养

1.4.5体外共培养模型构建

1.4.6体外共培养模型电阻测定

1.4.7体外共培养模型的渗透率测定

1.4.8氧糖剥夺/复氧

1.4.9 MTT测定周细胞的存活率

1.4.10冰冻切片免疫荧光染色

1.4.11细胞免疫荧光染色

1.4.12 实时荧光定量 PCR

1.4.13 酶联免疫吸附实验

1.4.14 FITC-葡聚糖渗漏

1.4.15蛋白质印迹分析

1.4.16质粒转染

1.5 统计学分析

2.结果

2.1.1rt-PA治疗加重脑缺血小鼠脑水肿和BBB超微结构破坏

2.1.2体外BBB模型构建

2.1.3 Rt-PA加重缺氧后后体外BBB破坏

2.2 rt-PA治疗后影响脑缺血后周细胞增殖、存活及炎症因子表达

2.2.1 rt-PA降低了脑缺血后周细胞Ki67 表达

2.2.2 rt-PA降低 OGD/R后周细胞存活率

2.2.3 rt-PA治疗增加OGD/R后周细胞的炎性因子分泌

2.2.4 rt-PA增加脑缺血后周细胞的炎性因子表达

2.2.5 rt-PA治疗引起的炎症反应参与了 BBB的破坏

2.3 rt-PA治疗加重脑缺血后血脑屏障的破坏需要周细胞上 PDGFR-b的介导

2.3.1 rt-PA增加 OGD/R后周细胞PDGFR-b表达

2.3.2 rt-PA增加脑缺血后周细胞 PDGFR-b表达

2.3.3 e-PDGFR-b 转染后周细胞PDGFR-b表达测定

2.3.4 rt-PA对PDGFR-b过表达周细胞共培养模型完整性影响

2.3.5 rt-PA不影响 PDGFR-b过表达周细胞炎症因子表达

2.3.6 rt-PA不影响 PDGFR-b过表达周细胞 TGF-b和 p-Smad2/3 的表达

2.4 Rt-PA加重脑缺血后血脑屏障的破坏需要周细胞 TGF-b介导

2.4.1 rt-PA降低了周细胞 OGD/R 后TGF-b和p-Smad2/3表达

2.4.2 rt-PA降低了脑缺血后周细胞TGF-b表达

2.4.3外源性TGF-b治疗增加OGD/R后周细胞TGF-b水平

2.4.4 TGF-b治疗减轻了 BBB破坏

2.4.5 TGF-b治疗降低了周细胞炎症因子表达

3讨论

结论

参考文献

综述:周细胞与血脑屏障功能研究进展

综述参考文献

致谢

个人简历