黄瓜花发育基因CsWIP1和CsPI的互作组分筛选

目录

声明

第一章 文献综述

1.1 植物性型分化的研究进展

1.1.1 植物性型分化相关基因型的研究进展

1.1.2 植物性型分化相关激素的研究进展

1.1.3 植物性型分化相关环境条件的研究进展

1.1.4 黄瓜性型分化的研究进展

1.2 酵母杂交系统的研究进展

1.2.1 酵母杂交系统的构建原理

1.2.2 酵母杂交系统的局限性和改进发展

1.2.3 酵母杂交技术在植物中的应用

1.3 WIP1 基因的研究进展

1.4 PI 基因的研究进展

1.5 本研究的目的和意义

第二章 酵母文库的构建

2.1.1 材料与主要试剂

2.1.2 试验所用引物

2.1.3 转化载体和菌株

2.1.4 主要实验仪器

2.2 方法

2.2.1总RNA的提取

2.2.2 cDNA文库的构建

2.2.3初级cDNA文库百万克隆扩增及质粒提取

2.3结果与分析

2.3.1 黄瓜总RNA的提取和纯化

2.3.2 双链cDNA合成与纯化

2.3.3 cDNA文库插入片段大小及重组率检测

2.4 讨论

第三章 CsWIP1 互作蛋白的筛选

3.1 试验材料及试剂

3.2 试验方法

3.2.1 诱饵载体的构建

3.2.2 CsWIP1 互作蛋白的筛选

3.3 结果与分析

3.3.1 PCR扩增CsWIP1 基因的结果

3.3.2 重组pGBKT7- CsWIP1 质粒的PCR鉴定结果

3.3.3 文库初步选筛结果

3.3.4 阳性克隆的鉴定

3.3.5 序列分析及候选因子的回转验证

3.3.6候选因子的功能预测

3.4 讨论

第四章CsPI互作组分的筛选

4.1 试验材料及试剂

4.2试验方法

4.2.1 诱饵载体的构建

4.2.2 CsPI互作蛋白的筛选

4.3.1 CsPI目的片段的鉴定

4.3.2 重组pCsPI-AbAi 质粒的PCR 鉴定结果

4.3.3 重组pCsPI-AbAi 质粒的酶切线性化及插入检测

4.3.4 文库初步筛选结果

4.3.5 候选转录因子分析

4.4 讨论

第五章 结论与展望

5.1主要结论

5.2展望

参考文献

附录

附录A pAbAi 载体质粒图谱

附录B pGADT7-Rec 载体质粒图谱

附录C CsPI 的互作组分筛选结果

缩略词表

致谢

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