硒酸壳聚糖在Calu--1肺癌细胞中抗肿瘤机制的研究

目录

声明

摘要

1前言

1．1肺癌概述

1．2细胞的凋亡概述

1．2．1细胞凋亡的特征

1．2．2细胞凋亡的调控机制

1．3．1多糖与壳聚糖

1．3．2硒多糖概述

1．3．3硒酸壳聚糖的制备

1．3．4硒酸壳聚糖的研究进展

1．4本课题研究目的与意义

2材料与方法

2．1．1主要试剂

2．1．2主要仪器设备

2．1．3实验用细胞株

2．1．4主要作用药物

2．2主要实验方法

2．2．1细胞培养方法

2．2．2 MTT比色法验证硒酸壳聚糖对Calu-1细胞的抑制作用

2．2．3 Calu-1细胞形态的研究

2．2．4 Annexin V-FITC／PI双染流式检测Calu-1细胞凋亡

2．2．6硒酸壳聚糖处理后Calu-1细胞内线粒体膜电位的变化

2．2．7硒酸壳聚糖作用下Calu-1细胞内活性氧的变化

2．2．8荧光定量PCR检测细胞内凋亡相关基因的表达变化

2．2．9蛋白免疫印迹检测Calu-1细胞内凋亡相关蛋白表达的变化

2．3数据统计分析

3结果与讨论

3．1 MTT比色法检测硒酸壳聚糖对Calu-1细胞的增殖抑制作用

3．2硒酸壳聚糖作用下细胞形态变化

3．2．1扫面电镜观察Calu-1细胞形态变化

3．2．2 Hoechst 33342／PI染色检测细胞凋亡

3．3硒酸壳聚糖诱导人肺癌Calu-1细胞凋亡研究

3．4流式细胞术检测细胞周期变化

3．5 Rhl23染色检测细胞线粒体跨膜电位的变化

3．6细胞内活性氧(ROS)含量的检测

3．7荧光定量PCR检测凋亡相关基因的表达变化

3．8免疫印迹检测细胞凋亡蛋白的变化

4结论

4．1全文总结

4．2论文创新点

4．3论文不足

5展望

参考文献

7攻读硕士学位期间发表论文情况

致谢