甲基硒酸对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981增殖和细胞周期的影响及其分子机制的研究

摘要

背景与目的：肺癌是当今世界上对人类健康和生命危害最大的恶性肿瘤。近半个世纪以来，尽管各种肺癌治疗手段不断发展，但遗憾的是包括我国在内的绝大多数国家肺癌的疗效并无明显提高，肺癌总的治愈率仍低于15％。因此研究和开发抗肺癌的有效新药物仍是肿瘤领域的重要任务。自20世纪70年代以来，人们逐渐注意到必需微量元素硒及其化合物的防癌抗癌作用。国内外学者进行了大量的流行病学研究和基础研究，发现硒及其不同形式的化合物能够降低包括肺癌在内多种肿瘤的发病率，也能够明显抑制乳腺癌、前列腺癌等细胞株体外增殖能力，并可以通过多种机制导致癌细胞周期阻滞而影响细胞增殖。这无疑也为开发抗肺癌新药提供了新的思路。目前在硒的体外研究中，甲基硒酸（methylseleninic acid，MSA）可能是最有希望的硒化合物。因为被细胞摄取后，MSA可以通过非β裂解酶途径（β裂解酶在体外细胞中表达水平受限），持续稳定地转化为甲基硒（甲基硒抑制细胞生长的能力最强，但该化合物非常不稳定），故MSA的抗癌效能强于其他依赖于β裂解酶代谢途径的硒化合物，如无机硒化合物或硒-甲基硒代半胱氨酸等。 迄今，有关甲基硒酸对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981的抗癌作用及其分子机理的研究国内外均无报道。故本研究应用MSA处理人高转移大细胞肺癌细胞株L9981，旨在初步探讨甲基硒酸对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981是否具有生长抑制、细胞周期阻滞作用及其可能的分子机制。 方法：本研究应用体外细胞培养技术，通过台盼蓝计数法观察MSA对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981生长曲线的影响，平板法克隆形成实验观察MSA对L9981肺癌细胞株克隆形成能力的影响，流式细胞术检测MSA对L9981肺癌细胞株细胞周期分布的影响以及周期相关基因p53和p21表达水平的变化。 结果：本研究在国内外首次观察到：（1）MSA可显著抑制人高转移大细胞肺癌细胞株L9981的体外增殖能力，并具有剂量依赖性，0.5、2.5、5.0和7.5μmol/LMSA组L9981细胞株的体外增殖能力均显著低于对照组（P＜0.05或P＜0.01）；5.0μmol/L MSA抑制L9981细胞株体外增殖能力的作用类似于2.5μg/mlDDP（8.3μmol/L DDP）的抑制作用；（2）MSA浓度在2.5、5.0和7.5μmol/L时可显著抑制L9981的克隆形成能力（P＜0.05），并具有剂量依赖性；（3）MSA能将人高转移大细胞肺癌细胞株L9981阻滞在G1/G0期，MSA的这种阻滞作用具有时间依赖性；（4）MSA能将人高转移大细胞肺癌细胞株L9981阻滞在G2/M期，MSA的这种阻滞作用具有剂量依赖性；（5）MSA能显著上调人高转移大细胞肺癌细胞株L9981 p53和p21表达水平（P＜0.01），并具有明显的剂量依赖性。 结论：（1）MSA可显著抑制人高转移大细胞肺癌细胞株L9981的体外增殖能力，并具有剂量依赖性，可将细胞阻滞于G0/G1期和G2/M期；（2）MSA可显著抑制L9981肺癌细胞株的体外克隆形成能力，并呈剂量依赖性；（3）MSA的抗肺癌作用可能与其上调L9981肺癌细胞株p53和p21基因表达水平有关。

目录

声明

摘要

前言

第一部分甲基硒酸对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981生长曲线的影响

第二部分甲基硒酸对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981克隆形成能力的影响

第三部分甲基硒酸对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981细胞周期分布时相以及细胞周期相关基因表达的影响

讨论

全文总结

参考文献

综述硒防癌抗癌作用及其机理研究进展

四川大学七年制学生论文研究创新自我评述

个人简历

致谢

文献查新