宝兴百合组织培养和试管鳞茎膨大研究

摘要

宝兴百合（Lilium duchartrei Franch.）是百合科(Liliaceae)百合属（Lilium）多年生球根花卉，也是中国特有的野生卷瓣组百合，多生长于云、川西北部地区以及贵、藏等地湿润且寒冷的高原草甸上。由于宝兴百合不仅极具观赏价值，亦具较高的药用价值，因此市场前景即为广阔，与此同时人为性过度开采造成宝兴百合数量急剧减少。目前，关于宝兴百合的研究和报道常见于资源调查和群居核型分析方面，有关引种驯化、资源保存等详细研究报道较少，缺少对组织培养体系的完整研究。　　本文以宝兴百合鳞片作为外植体，分别探讨了宝兴百合试管苗的获取途径和诱导试管鳞茎形成与膨大的影响因素，通过鳞片不定芽诱导、不定芽增殖和生根培养，重点探讨了温度、蔗糖浓度、NAA浓度、铵硝比以及PP333浓度等对鳞茎形成及膨大的影响，以期建立完善的宝兴百合离体再生体系。结论如下:　　(1)以野生宝兴百合外层鳞片进行不定芽诱导，最佳消毒时间组合为乙醇处理15s、HgCl2处理16min，其污染率为3.33％，死亡率为8.33％;鳞片近轴端向上平放的不定芽诱导率＞近基部端竖直插入;抑制褐化效果最佳培养基为MS+0.5mg/L6-BA+1.0mg/L2，4-D+1.0mg/L AC，褐化率仅为13.33％;而添加AC的培养基为MS+0.5mg/L6-BA+1.0mg/L2，4-D+0.1mg/L AC时能保证较低褐化率的同时具有较高分化率。　　(2)宝兴百合试管苗最适继代培养基为MS+0.5mg/L6-BA+0.2mg/L NAA，增殖系数为11.00。　　(3)添加蔗糖有利于鳞茎的形成和膨大，当浓度为60g/L时，分化率为75.00％，鳞茎鲜重增重4.82倍;添加NAA有利于鳞茎的形成和膨大，当浓度为0.5mg/L时，分化率为100.00％，鳞茎鲜重增重3.33倍;提高NH4+-N∶NO3-N-比有利于鳞茎的形成和膨大，当NH4+-N∶NO3-N-比数为60mmol/L∶40mmol/L，即总氮量为100mmol/L时，分化率为95.00％，鳞茎鲜重增重3.33倍;选择适宜温度有利于鳞茎的形成和膨大，当温度为23±1℃时，分化率为96.67％，鳞茎鲜重增重2.50倍;添加PP333有利于鳞茎膨大，当PP333浓度为5mg/L时鳞茎鲜重增重3.87倍。　　(4)宝兴百合试管苗瓶外生长培养基质为草炭土∶蛭石∶珍珠岩=1∶1∶1，最终成活率可达到93.33％。

目录

声明

摘要

缩略语表

引言

第一章文献综述

1．1百合的生态特征和经济价值

1．1．1百合的生态特征

1．1．2百合的经济价值

1．2百合组培体系的建立

1．2．1外植体的选择、消毒与放置方式

1．2．2培养基与激素配比

1．2．3环境因素

1．3百合组培鳞茎形成与膨大研究进展

1．3．1植物生长调节剂

1．3．2铵硝比和蔗糖浓度

1．3．3培养温度

1．4百合组培生根与移栽研究

1．5宝兴百合的研究现状

1．5．1组织培养方面的研究

1．5．2其他方面的研究

第二章目的与意义

第三章试验内容、材料和方法

3．1技术路线

3．2研究内容

3．3试验材料处理

3．4初代培养

3．4．1鳞片放置方式

3．4．2 AC与2，4-D浓度配比

3．5继代培养

3．6鳞茎形成与膨大影响试验

3．6．1蔗糖浓度对鳞茎形成及膨大的影响

3．6．2 NAA浓度对鳞茎形成及膨大的影响

3．6．3铵硝比对鳞茎形成及膨大的影响

3．6．4温度对鳞茎形成及膨大的影响

3．6．5 PP333对鳞茎膨大的影响

3．7炼苗与移栽

3．8相关指标的计算方法和测量方法

3．9数据处理及分析

第四章结果与分析

4．1初代培养

4．1．1鳞片灭菌时间对不定芽诱导的影响

4．1．2鳞片不同放置方式对不定芽诱导的影响

4．1．3不同AC与2，4-D浓度配比对不定芽诱导的影响

4．2继代培养

4．3鳞茎形成与膨大培养

4．3．1蔗糖浓度对鳞茎形成及膨大的影响

4．3．2 NAA浓度对鳞茎形成及膨大的影响

4．3．3铵硝比对鳞茎形成及膨大的影响

4．3．4温度对鳞茎形成及膨大的影响

4．3．5 PP333浓度对鳞茎膨大的影响

4．4炼苗移栽

第五章讨论

5．1外植体的筛选和消毒处理

5．2培养条件的筛选

5．3激素影响

5．4铵硝配比的影响

5．5组培苗的炼苗与移栽

第六章结论

参考文献

图版

致谢