曲美他嗪对犬急性心肌梗死后延迟再灌注中缺血区心肌细胞凋亡的影响

摘要

目的:再灌注治疗是目前治疗急性心肌梗死(acute myocardial infarction AMI)的有效方法之一。业已证实，心肌梗死后早期恢复血液供应，能减少梗死面积，同时也可能使心肌细胞损伤进一步加重即缺血-再灌注损伤(ischemia-Reperfusion injuryIRl)。心肌梗死后的延迟再灌注(late reperusion,LR)仍然有利于改善心肌重构，保护心功能。但最近有研究显示，延迟再灌注也存在缺血-再灌注损伤现象。曲美他嗪(trimetazidine，TMZ)是一种治疗缺盘性心脏病、具有抗氧化效应的代谢类药物，已广泛应用予临床；有资料报道曲美他嗪对心肌细胞早期缺血-再灌注损伤有显著的保护作用，然而在延迟再灌注中是否仍具有心肌保护作用，国内外尚未见报道。本实验通过建立犬急性心肌梗死-延迟再灌注模型，以探讨曲美他嗪在急性心肌梗死后延迟再灌注中对梗死周边缺血区心肌细胞的保护作用及其机制。 方法:24只健康成年犬随机平均分为3组：假手术组、单纯延迟再灌注组(Latereperfusion group，LR)、延迟再灌注预加曲美他嗪组(Late reperfusion＋rimetazidinegroup，LR+TMZ)。假手术组和LR组灌服生理盐水，LR＋TMZ组灌服曲美他嗪(2mg·kg-1·d-1)共14d。所有犬于d14灌药2h后行静脉麻醉，术中维持麻醉、心电监护、气管插管接呼吸机辅助呼吸，常规消毒，开胸。假手术组不结扎冠状动脉；LR和LR＋TMZ在高位结扎左冠状动脉前降支10 h，再灌注10h，制成急性心肌梗死-延迟再灌注模型。各组经上述处理后取梗死周边缺血区心肌组织。采用末端脱氧核糖核甘酸转移酶(TdT)介导的带荧光的dUTP缺口末端标记(TdT-mediated dUTP nickend labeing,TUNEL)法法测心肌细胞凋亡指数(Al)，免疫组织化学法测Bcl-2、Bax、细胞色素C(Cytochrome C，cyt-c)和凋亡诱导因子(Apoptosis-inducing factor，AlF)蛋白表达。 结果:与LR组相比，LR＋TMZ组心肌细胞AI显著降低(p<0.01)，Bax、Cytochrome C和AIF蛋白的表达明显减少(p<0.01)，而Bcl-2蛋白的表达明显增高(p<0.01)；各指标分别与假手术组比较，差异均有显著性(p<0.001)。 结论:曲美他嗪在急性心肌梗死后延迟再灌注中可减少梗死周边缺血区心肌细胞的凋亡，其机制可能与增加Bcl-2蛋白的表达，减少Bax、细胞色素C、AlF蛋白的表达有关。

目录

论文说明：英文缩写语简表(Abbreviations)

声明

1.前言

2.材料与方法

2.1材料

2.1.1实验动物

2.1.2主要试剂及材料

2.1.3主要仪器设备

2.2方法

2.2.1动物分组

2.2.2模型制作

2.2.3标本采集与处理

2.2.4载玻片处理

2.2.5石蜡切片制作

2.2.6心肌梗死边缘区心肌细胞凋亡指数测定

2.2.7心肌梗死边缘区Bcl-2、Bax、Cyt-C、AIF蛋白表达测定

2.2.8统计学分析

3结果

3.1曲美他嗪对心肌细胞凋亡指数的影响

3.2曲美他嗪对Bcl-2 Bax Cyt-C AIF蛋白表达的影响

4讨论

4.1细胞凋亡

4.1.1细胞凋亡溉述

4.1.2 Bcl-2家族与细胞凋亡

4.1.3 Cyt-C与细胞凋亡

4.1.4 AIF与细胞凋亡

4.1.5缺血再灌注损伤与心肌细胞凋亡

4.2延迟再关注及其效应

4.3曲美他嗪及其保护作用

4.3.1曲美他嗪的药理作用机制

4.3.2能量代谢途径改变对心肌细胞凋亡的影响

4.3.3曲美他嗪在延迟再灌注中的保护作用

5结论

参考文献

附录 个人简介

致谢

综述：曲美他嗪在心血管疾病中的临床应用进展