中枢神经系统炎性脱髓鞘疾病新型生物标记物研究

摘要

目的：探讨中枢神经系统（CNS）炎性脱髓鞘疾病相关的一些新型生物标记物，包括 B细胞趋化因子 CXCL13、神经丝蛋白轻链（NFL）、25-羟基维生素D3[25(OH)D3]的表达特点及其与临床、影像的关系，探讨维生素 D受体基因（VDR）、水通道蛋白4（AQP4）基因、Fc受体样3（FcRL3）基因单核苷酸多态性（SNPs）突变情况，为CNS炎性脱髓鞘疾病发病机制的探索、鉴别诊断和临床转归提供依据。
　　方法：收集就诊于海军总医院神经内科的 CNS炎性脱髓鞘疾病患者及正常对照（NC），收集实验组临床、影像信息及各组血清、全血和脑脊液（CSF）标本，以酶联免疫吸附实验（ELISA）方法检测血清和 CSF中 CXCL13水平及 CSF中NFL水平，以质谱法检测血清25(OH) D3水平，以第一代基因测序方法检测VDR基因、AQP4基因和FcRL3基因SNPs序列。
　　结果：（1）CIS组、MS组、NMOSD组血清和CSF中CXCL13水平均高于NC组（P<0.05）。NMOSD组血清和CSF中CXCL13水平明显高于CIS组和MS组（P<0.05），MS组CSF中CXCL13水平明显高于CIS组（P<0.05）。CIS组、MS组、NMOSD组CSF中CXCL13水平分别与其EDSS评分和MRI上病灶强化相关（P<0.05）。（2）CIS组、MS组、NMOSD组CSF中NFL水平均高于NC组（P<0.05）。CIS组、MS组、NMOSD组组间CSF中NFL水平无显著统计学差异（P>0.05）。CIS组、MS组、NMOSD组CSF中NFL水平与其EDSS评分和MRI上病灶强化相关（P<0.05）。（3） CIS组、MS组、NMOSD组血清25(OH)D3水平均明显低于NC组（P<0.05）。CIS组、MS组、NMOSD组组间血清25(OH)D3水平比较无显著统计学差异（P>0.05）。CIS组、MS组、NMOSD组组间血清25(OH)D3水平与EDSS评分和CSF中NFL水平无明显相关（P>0.05）。（4）CIS组、MS组、NMOSD组VDR基因rs2228570位点突变率明显高于NC组，且具有统计学差异（P<0.05）。CIS组、NMOSD组 rs7975232位点突变率明显高于 NC组，且具有统计学差异（P<0.05）；MS组rs7975232位点突变率高于NC组，但无统计学差异（P>0.05）。（5）CIS组、MS组、NMOSD组AQP4基因rs2075575、rs3763043、rs14393位点突变率分别与 NC组比较均无统计学差异（P>0.05）；NMOSD组AQP4-Ab阳性与否对AQP4基因SNPs亦无影响（P>0.05）。（6）CIS组、NMOSD组FcRL3基因rs7528684和rs3761959位点突变率明显高于NC组，且具有统计学差异（P<0.05）；MS组rs7528684和rs3761959位点突变率高于NC组，但无统计学差异（P>0.05）。MS组、NMOSD组 rs945635位点突变率明显高于NC组，且具有统计学差异（P<0.05）；CIS组rs945635位点突变率高于NC组，但无统计学差异（P>0.05）。
　　结论： CSF中CXCL13水平和CSF中NFL水平是预测CIS、MS和NMOSD的残障程度及疾病活动性的生物学指标。CIS、MS和NMOSD患者均存在维生素D缺乏，但其血清25(OH) D3水平与残障程度不相关。VDR基因rs7975232和rs2228570位点突变、FcRL3基因rs7528684、 rs945635和rs3761959位点突变可增加CIS、MS、NMOSD患者发病风险，但对区分CNS炎性脱髓鞘疾病的种类和判断其转归均无明显作用。AQP4基因SNPs对CIS、MS、NMOSD患者发病无明显影响。

目录

声明

英文缩略词（abbreviations）

前言

第一部分：CXCL13、NFL、25(OH)D3与CNS炎性脱髓鞘疾病的相关性研究

1材料与方法

1.1 研究对象

1.2入选及排除标准

1.3临床、影像资料收集

1.4标本资料收集

1.5 血清和CSF中CXCL13水平检测方法

1.6 神经丝蛋白轻链（NFL）检测方法

1.7 血清25(OH)D3检测方法

1.8 统计学方法

2 结果

2.1 血清和CSF中CXCL13水平

2.2 CSF中NFL水平

2.3 CSF中NFL水平分析

2.3血清25(OH)D3水平

3讨论

3.1 血清和CSF中CXCL13水平与CNS炎性脱髓鞘疾病的关系

3.2 CSF中NFL水平与CNS炎性脱髓鞘疾病的关系

3.3 血清25(OH) D3水平与CNS炎性脱髓鞘疾病的关系

第二部分：VDR、AQP4、FcRL3基因与CNS炎性脱髓鞘疾病的相关性研究

1 材料与方法

1.1 研究对象

1.2入选及排除标准

1.3资料收集

1.4 基因提取方法

1.5 PCR扩增及测序

1.6 基因检测结果判读

1.7 统计学方法

2 结果

2.1 人口学资料

2.2 VDR基因SNPs检测结果

2.3 AQP4基因SNPs检测结果

2.2 FcRL3基因SNPs检测结果

3 讨论

3.1 VDR基因SNPs对CNS炎性脱髓鞘疾病的影响

3.2 AQP4基因SNPs对CNS炎性脱髓鞘疾病的影响

3.3 FcRL3基因SNPs对CNS炎性脱髓鞘疾病的影响

结论

参考文献

附录

在学期间研究成果目录

致谢

综述:临床孤立综合征研究进展临床孤立综合征研究进展