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摘要
缩写词表
1．1纤锥素资源的开发利用
1．2纤维素的结构
1．3纤维素的微生物降解
1．3．1纤维素降解微生物
1．3．2纤维素降解机制
1．4滑动
1．4．1 Myxococcus xanthus的滑动
1．4．2 Flavobacterium johnsoniae的滑动
1．5 Cytophaga hutchinsonii的研究背景
1．5．2 C．hutchinsonii的研究进展
1．6 IX型分泌系统(T9SS)
1．6．1 T9SS的组成
1．6．2 CTD蛋白的分泌后锚定
1．6．3 C．hutchinsonii中的T9SS
1．7二硫键氧化还原酶
1．7．1真核生物中的二硫键氧化还原酶
1．7．2原核生物中的二硫键氧化还原酶
1．8论文的立题和工作思路
第二章C．hutchinsonii中二硫键氧化还原酶CHU_1165的鉴定及功能研究
2．1．1菌种与质粒
2．1．2实验中用到的引物
2．1．3主要试剂和仪器
2．1．4培养基和缓冲液
2．1．5分子生物学反应体系及操作
2．1．6 E．coil感受态的制备及热激转化
2．1．7 C．hutchinsonii感受态的制备及电击转化
2．1．8目的蛋白的异源表达和纯化
2．1．9聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)
2．1．10再生无定形纤维素(RAC)的制备
2．1．11蛋白浓度测定(Bradford法)
2．1．12滤纸降解实验
2．1．13软琼脂表面的运动观察
2．1．15纤维素酶活的测定
2．1．16纤维素吸附实验
2．1．17蛋白质谱鉴定
2．1．18蛋白定位
2．1．19胰岛素(Insulin)还原实验
2．1．20细胞抗逆性实验
2．2实验结果
2．2．2 CHU_1165中半胱氨酸突变对其功能的影响
2．2．3 CHU_1165的异源表达和活性
2．2．4 CHU_1165的定位及氧化还原态
2．2．5不同碳源的生长曲线
2．2．7 chu_1165对纤维素吸附的影响
2．2．8 chu_1165对胞外蛋白的影响
2．2．9二硫键氧化还原剂对细胞活力的影响
2．2．10 C．hutchinsonii中Dsb同源蛋白的功能验证
2．3讨论
第三章C．hutchinsonii中T9SS相关基因chu_3238的功能研究
3．1材料和方法
3．1．1菌种及质粒
3．1．2实验中用到的引物
3．1．3主要试剂和仪器
3．1．4培养基和缓冲液
3．1．5分子生物学反应体系及操作
3．1．6 E．coli感受态的制备和热激转化
3．1．14细胞各组分蛋白的提取
3．1．15荧光定量PCR检测基因转录水平
3．1．16蛋白的定位
3．1．17细胞的抗逆性测定
3．2实验结果
3．2．1 CHU_3238的序列分析
3．2．2基因的敲除和回补
3．2．3 Δ3238突变株表型研究
3．2．4 chu_3238对纤维素酶活的影响
3．2．5 chu_3238对蛋白分泌的影响
3．2．6 chu_3238对ChuDegQ转录水平的影响
3．2．7 CHU_3238的定位
3．2．8细胞的抗逆性检测
3．3讨论
全文总结与展望
附录
参考文献
在读期间发表的学术论文
致谢
山东大学;
