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摘要
缩略词表
1．1研究背景
1．1．1褐藻酸裂解酶
1．1．2石莼多糖裂解酶
1．2立题依据
1．3研究内容
第二章PL36家族褐藻酸裂解酶Aly36B的分离纯化与性质研究
2．1引言
2．2实验材料
2．2．1菌株与质粒
2．2．2主要药品和试剂盒
2．2．3实验仪器
2．2．4数据库与分析软件
2．2．5培养基
2．3实验方法
2．3．1表达载体的构建
2．3．2 Aly36B蛋白的异源表达与纯化
2．3．3 Aly36B重组酶性质研究
2．4结果与分析
2．4．1 Aly36B的序列分析、异源表达与纯化
2．4．2 Aly36B的诱导表达和纯化
2．4．3 Aly36B的酶学性质
2．5讨论
第三章PL36家族褐藻酸裂解酶Aly36B的结构解析及催化机制研究
3．1引言
3．2实验材料
3．2．1菌株与载体
3．2．2药品和试剂盒
3．2．3实验仪器
3．2．4数据库及分析软件
3．2．5培养基配制
3．3实验方法
3．3．1表达载体的构建
3．3．2 Aly36B蛋白的异源表达与纯化
3．3．3突变体的构建
3．3．4突变体的纯化与酶活测定
3．3．5蛋白晶体的培养及优化
3．3．6数据收集与晶体结构解析
3．3．7 Aly36B与褐藻酸寡糖的共结晶与数据收集
3．3．8复合物结构解析
3．3．10 Aly36B分子中钙离子的螯和
3．4结果与分析
3．4．1 Aly36B的结晶和结构分析
3．4．2 Aly36B蛋白分子中所含金属离子的鉴定及功能分析
3．4．3 Aly36B与底物的共结晶及复合物结构解析
3．4．4 Aly36B中参与底物结合和催化的重要氨基酸残基的鉴定
3．4．5褐藻酸裂解酶Aly36B的催化机制分析
3．4．6 PL36家族褐藻酸裂解酶催化机制与其它家族褐藻酸裂解酶催化机制的比较
3．5讨论
第四章PL24家族石莼多糖裂解酶Uly1的异源表达与酶学性质研究
4．1引言
4．2实验材料
4．2．1菌株与质粒
4．2．2试剂和试剂盒
4．2．3实验仪器
4．2．4数据库及分析软件
4．2．5培养基配制
4．3实验方法
4．3．1表达载体的构建
4．3．4 Uly1重组酶性质研究
4．4结果与分析
4．4．1序列比对分析
4．4．2 Uly1的诱导表达和纯化
4．4．3 Uly1蛋白的酶学性质
4．5讨论
第五章PL24家族石莼多糖裂解酶Uly1的结构解析及催化机制研究
5．1引言
5．2实验材料
5．2．1菌株与载体
5．2．2药品和试剂盒
5．2．3实验仪器
5．2．4数据库与分析软件
5．2．5培养基配制
5．3实验方法
5．3．1表达载体的构建
5．3．2 Uly1蛋白的异源表达与纯化
5．3．3蛋白晶体的培养及优化
5．3．4数据收集与晶体结构解析
5．3．5突变体的构建
5．3．6突变体的表达和纯化
5．4结果与分析
5．4．2 Uly1的结晶和整体结构分析
5．4．3 Uly1中关键氨基酸的鉴定及功能分析
5．4．4石莼多糖裂解酶Uly1的催化机制分析
5．5讨论
全文总结与展望
一、本论文取得的创新性成果
二、本论文的不足与下一步的研究方向
参考文献
在读期间论文发表
致谢
山东大学;
