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2018年宁夏乙脑暴发的病原学研究和现场调查

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目录

引言

材料与方法

1 材料

2 主要设备仪器和耗材

3 标本采集

3.1患者标本采集

3.2蚊虫标本采集

4 BHK-21和Vero细胞的培养

5 乙脑病毒和西尼罗病毒IgM抗体检测

5.1上海贝西乙脑病毒IgM抗体检测试剂盒检测流程

5.2 美国Inbios乙脑病毒IgM抗体ELISA检测试剂盒检测流程

5.3西尼罗病毒IgM抗体检测

6中和抗体检测

6.1甲基纤维素培养基配制

6.2结晶紫配制

6.3中和实验

7 病毒分离、纯化和电镜观察

7.1 蚊虫标本处理与病毒分离

7.2脑脊液标本的病毒分离和纯化

7.3病毒的电镜观察

8病毒株(NX1889)在不同细胞株的细胞病变作用

9 空斑形成试验测定病毒滴度

10 病毒对小鼠的致病性

11 病毒核酸检测及基因片段扩增

11.1病毒核酸提取

11.2 cDNA文库制备

11.3qRT-PCR检测乙脑病毒和西尼罗病毒基因

11.4乙脑病毒基因扩增及序列测定

12 乙脑病例的流行病学特征和时空分布特征

13 乙脑病毒基因序列系统进化分析

结果

1 乙脑病例标本的实验室检测

1.1乙脑病毒和西尼罗病毒IgM抗体的检测

1.2乙脑病毒和西尼罗病毒中和抗体检测

1.3病例标本乙脑病毒和西尼罗病毒基因的qRT-PCR检测

1.4脑脊液标本中乙脑病毒的分离与纯化

2 自然界蚊虫乙脑病毒感染的调查

2.1 蚊虫标本的采集与分类

2.2 蚊虫标本中乙脑病毒基因检测和病毒分离

3 2018年宁夏乙脑暴发的时空分布特征

3.1 2018年宁夏暴发的时空分布

3.2 实验室确诊乙脑病例时空分布

4乙脑病毒株(NX1889)的生物学表型研究

4.1病毒的电镜观察

4.2 病毒株NX1889在不同细胞株的病变作用

4.3 NX1889对乳鼠的致病性

5 2018年宁夏流行的乙脑病毒分子生物学特征

5.1 乙脑分离株(NX1889)的全序测定及基因片段扩增

5.2 乙脑病毒基因序列系统进化分析

讨论

1. 此次疫情是乙脑吗?

2.引起本次乙脑暴发的乙脑病毒属于哪个基因型?

3.本次乙脑暴发中存在西尼罗病毒感染吗?

4.此次乙脑暴发为什么发生在宁夏?

5 本次疫情对目前乙脑防控的提示

6.本研究的创新和不足

结论

参考文献

综述:乙脑病毒和乙脑

综述参考文献

攻读学位期间的研究成果

缩略词表(附录)

致谢

声明

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著录项

  • 作者

    刘文婧;

  • 作者单位

    青岛大学;

  • 授予单位 青岛大学;
  • 学科 病原生物学
  • 授予学位 硕士
  • 导师姓名 于红,王环宇;
  • 年度 2020
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类
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