引言
材料与方法
1 材料
2 主要设备仪器和耗材
3 标本采集
3.1患者标本采集
3.2蚊虫标本采集
4 BHK-21和Vero细胞的培养
5 乙脑病毒和西尼罗病毒IgM抗体检测
5.1上海贝西乙脑病毒IgM抗体检测试剂盒检测流程
5.2 美国Inbios乙脑病毒IgM抗体ELISA检测试剂盒检测流程
5.3西尼罗病毒IgM抗体检测
6中和抗体检测
6.1甲基纤维素培养基配制
6.2结晶紫配制
6.3中和实验
7 病毒分离、纯化和电镜观察
7.1 蚊虫标本处理与病毒分离
7.2脑脊液标本的病毒分离和纯化
7.3病毒的电镜观察
8病毒株(NX1889)在不同细胞株的细胞病变作用
9 空斑形成试验测定病毒滴度
10 病毒对小鼠的致病性
11 病毒核酸检测及基因片段扩增
11.1病毒核酸提取
11.2 cDNA文库制备
11.3qRT-PCR检测乙脑病毒和西尼罗病毒基因
11.4乙脑病毒基因扩增及序列测定
12 乙脑病例的流行病学特征和时空分布特征
13 乙脑病毒基因序列系统进化分析
结果
1 乙脑病例标本的实验室检测
1.1乙脑病毒和西尼罗病毒IgM抗体的检测
1.2乙脑病毒和西尼罗病毒中和抗体检测
1.3病例标本乙脑病毒和西尼罗病毒基因的qRT-PCR检测
1.4脑脊液标本中乙脑病毒的分离与纯化
2 自然界蚊虫乙脑病毒感染的调查
2.1 蚊虫标本的采集与分类
2.2 蚊虫标本中乙脑病毒基因检测和病毒分离
3 2018年宁夏乙脑暴发的时空分布特征
3.1 2018年宁夏暴发的时空分布
3.2 实验室确诊乙脑病例时空分布
4乙脑病毒株(NX1889)的生物学表型研究
4.1病毒的电镜观察
4.2 病毒株NX1889在不同细胞株的病变作用
4.3 NX1889对乳鼠的致病性
5 2018年宁夏流行的乙脑病毒分子生物学特征
5.1 乙脑分离株(NX1889)的全序测定及基因片段扩增
5.2 乙脑病毒基因序列系统进化分析
讨论
1. 此次疫情是乙脑吗?
2.引起本次乙脑暴发的乙脑病毒属于哪个基因型?
3.本次乙脑暴发中存在西尼罗病毒感染吗?
4.此次乙脑暴发为什么发生在宁夏?
5 本次疫情对目前乙脑防控的提示
6.本研究的创新和不足
结论
参考文献
综述:乙脑病毒和乙脑
综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
缩略词表(附录)
致谢
声明
青岛大学;