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姜黄素逆转人胆囊癌细胞GBC-SD多药耐药性的实验研究

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1.对象与方法

1.1 研究对象:

1.2 主要实验仪器与试剂:

1.3 实验方法:

2. 结 果

2.1 细胞活力

2.2 姜黄素对四种化疗药物的增敏作用:

2.3 RT-PCR检测GBC-SD胆囊癌细胞株MRD1、GST-πN 、TOPOⅡ基因的表达结果。

2.4 Elisa法检测GBC-SD胆囊癌细胞株MRD1、GST-πN 、TOPOⅡ基因的表达结果。蛋白水平的表达:

2.5 25μmol/L姜黄素增加细胞内ADR浓度的积累:

3.讨 论

3.1 胆囊癌概述

3.2中药在胆囊癌耐药中的应用中。

3. 结 论

参考文献

文献综述:胆囊癌病因研究进展

攻读学位期间发表文章情况

个人简介

致谢

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摘要

目的:  探讨姜黄素逆转人胆囊癌细胞多药耐药性(MDR)的作用及其相关机制。  方法:  体外培养具有先天耐药特性的胆囊癌细胞GBC-SD,做为实验对象,体外用MTT方法观察姜黄素使胆囊癌细胞GBC-SD对化疗药物敏感性的增加程度,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测姜黄素对胆囊癌细胞GBC-SD的多药耐药相关蛋白1(MDR1)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST-π)和DNA拓扑异构酶Ⅱ(TOPOⅡ)基因表达的影响;酶联免疫法检测姜黄素对人胆囊癌细胞多药耐药相关蛋白1(MDR1)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST-π)和DNA拓扑异构酶Ⅱ(TOPOⅡ)在蛋白水平的表达是否存在影响。  结果:  姜黄素在浓度25μmol/L时,对胆囊癌细胞GBC-SD没有毒性并能增加细胞对化疗药的敏感性,显著减少了阿霉素、表阿霉素、氟尿嘧啶、卡铂对GBC-SD细胞的IC50值,MDR逆转倍数达1.11-9倍;胆囊癌细胞GBC-SD可增加细胞内阿霉素的积累;但姜黄素在浓度25μmol/L时增高TOPOⅡ基因RNA和蛋白水平表达,不影响细胞MDRl、GST-π基因表达。  结论:  姜黄素在一定浓度时,对细胞没有毒性并能不同程度的逆转胆囊癌细胞的多药耐药性。姜黄素能有效逆转先天耐药GBC-SD细胞的多药耐药性,其机制可能是抑制了P-糖蛋白的药物外排生物学活性。

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