声明
(一)前言
(二)材料和方法
2.1 材料
2.1.1试验细胞
2.1.2主要实验仪器
2.1.3主要实验试剂
2.2方法
2.2.1细胞培养
2.2.2 ELISA法检测ALDH2抑制剂Daidzin最佳工作浓度
2.2.3 ALDH2基因shRNA序列、无关序列以及ANXA7基因过表达序列
2.2.4 细胞转染
2.2.5实时荧光定量PCR(qPCR)
2.2.6蛋白免疫印迹(western-blot)
2.2.7 细胞免疫荧光共定位
2.2.8 免疫共沉淀(CO-IP)
2.2.9 Transwell检测细胞迁移
2.2.10 Transwell检测细胞侵袭
2.2.11 统计学方法
(三)结果
3.1 ALDH2在Hca-P、Hca-F细胞中的表达差异
3.2 加入抑制剂后,ALDH2的表达情况
3.2.1、ELISA试剂盒检测ALDH2抑制剂的最佳工作浓度
3.2.2.加入不同浓度抑制剂后,western-blot、qPCR检测ALDH2的表达情况
3.3 ALDH2在加入抑制剂前后对肝癌细胞(Hca-P)迁移和侵袭行为的影响
3.4在Hca-P细胞中验证ALDH2与ANXA7为相互作用蛋白
3.4.1细胞免疫共定位实验
3.4.2免疫共沉淀实验
3.5 ALDH2对ANXA7基因表达的调控作用
3.6 ANXA7对ALDH2基因表达的调控作用
(四)讨论
(五)结论
参考文献
三、综述:ALDH2与其相关疾病研究进展
参考文献
致谢
大连医科大学;