蛹拟青霉（Paecilomyces militaris）中抗肿瘤活性物质的研究

摘要

该文是在该实验室大规模主要虫生真菌药物模型筛选的基础上,对该实验室保存的菌株蛹拟青霉[Paecilomycesmilitaris(Kob.)Brown&SmithexLiang]RCEF0718的抗肿瘤活性进行了进一步的研究.内容包括:菌株最佳发酵时间的确定;活性产物的分离提取;活性产物的纯化工艺;纯化样品的结构测定;纯化后样品对肿瘤细胞的抑制活性.纯化后样品的抗肿瘤实验研究结果表明,与对照组比较,Z及Z1-4组分在100μg/ml、20μg/ml,Z1-3、Z2-1、Z2-2组分在100 μg/ml 时对HepG<,2>细胞株的抑制率在1﹪水平是显著的,Z在4μg/ml,Z1-3、Z2-1在20μg/ml及4μg/ml浓度时对HepG<,2>细胞株的抑制率在5﹪水平显著.Z相组分纯化后的所有纯组分对肿瘤细胞的抑制率均不如Z相高,说明其对肿瘤细胞的抑制作用可能是因为几个组分共同起作用的结果.与对照组比较,Z、Z1-3、Z1-4、Z2-1在100μg/ml时,Z1-3组分在20μg/ml及Z2-2在4μg/ml浓度时对正常肝细胞株的抑制率在5﹪水平是显著的,但很明显,Z相及其纯化后的所有组分对正常肝细胞株的抑制率均明显低于其对于肝肿瘤细胞株的抑制率.

目录

文摘

英文文摘

综述

引言

材料与方法

结果与分析

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1.1抗肿瘤活性菌株筛选

1.3 Z相及S相标准曲线的绘制

2 RCEF0718最佳发酵时间的确定

3活性产物的分离提取

3.3乙酸乙酯与发酵液的最佳萃取体积研究

3.4乙酸乙酯与发酵液的最佳萃取次数研究

4活性组分的纯化工艺

4.2固定相的选择

4.3流动相的选择

4.4凝胶色谱

5纯度实验

5.1高效液相色谱(HPLC)

6 Z相中不同组分组成研究

6.1 Z相HPLC分析

7纯化后活性组分的结构鉴定与分析

7.1质谱分析(MS)

8纯组分的肿瘤抑制活性与细胞毒性(MTT)

8.1纯组分对肿瘤细胞的抑制率

8.2纯组分对正常细胞的细胞毒性

讨论

结论

参考文献

致谢

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