声明
中英文缩略词对照表
绪论
1 稽留流产
2 ROS和氧化应激
3 Nrf2/HO-1抗氧化通路
4 APPL1
第一部分 ROS诱导绒毛膜滋养细胞凋亡，下调APPL1以及Nrf2、HO-1抗氧化蛋白表达水平的机制研究
1 实验材料
1.1 研究对象
1.2 主要试剂
1.3 主要仪器及耗材
2 实验方法
2.1 标本处理和分组
2.2 绒毛组织SOD检测
2.3 免疫组化染色
2.4 绒毛组织DHE染色
2.5 绒毛组织TUNEL染色
2.6 绒毛组织中总RNA提取及测定
2.7 逆转录
2.8 实时荧光定量PCR
2.9 绒毛组织中总蛋白提取及测定
2.10 Western blot
2.11 统计学分析
3 实验结果
3.1 一般资料分析
3.2 MA组绒毛滋养细胞内ROS积累
3.3 MA组绒毛滋养细胞凋亡增多
3.4 MA组APPL1、Nrf2和HO-1表达水平下调
3.5 NAC、GSH或H2O2对Control组绒毛滋养细胞内ROS的影响
3.6 NAC、GSH或H2O2对Control组滋养细胞凋亡的影响
3.7 NAC、GSH或H2O2对Control组APPL1、Nrf2和HO-1表达水平的影响
4 讨论
第二部分 siAPPL1促进HTR-8/SVneo细胞内ROS积累，诱导细胞凋亡，下调Nrf2/HO-1抗氧化通路表达水平的机制研究
1 实验材料
1.1 HTR-8/SVneo细胞系
1.2 主要试剂
1.3 主要仪器及耗材仪器名称
2 实验方法
2.1 HTR-8/SVneo细胞的培养
2.2 siRNA转染
2.3 HTR-8/SVneo细胞预处理和分组
2.4 HTR-8/SVneo细胞ROS检测及DCF染色
2.5 HTR-8/SVneo细胞SOD检测
2.6 HTR-8/SVneo细胞TUNEL染色
2.7 CCK8细胞活力检测
2.8 凋亡流式细胞术
2.9 HTR-8/SVneo细胞中总RNA提取及测定
2.10 逆转录
2.11 实时荧光定量PCR
2.12 HTR-8/SVneo细胞中总蛋白提取及测定
2.13Western blot
2.14 统计学分析
3 实验结果
3.1 siAPPL1干涉效率验证
3.2 siAPPPL1-981组HTR-8/SVneo细胞内ROS积累
3.3 siAPPPL1-981组HTR-8/SVneo细胞凋亡增多
3.4 NAC或GSH预处理对siAPPPL1组HTR-8/SVneo细胞内ROS的影响
3.5 NAC或GSH预处理对siAPPPL1组HTR-8/SVneo细胞凋亡的影响
3.6 H2O2预处理对siAPPPL1组HTR-8/SVneo细胞内ROS的影响
3.7 H2O2预处理对siAPPPL1组HTR-8/SVneo细胞凋亡的影响
3.8 NAC、GSH 或 H2O2预处理对 siAPPPL1 组 HTR-8/SVneo 细胞中 APPL1 和Nrf2/HO-1抗氧化通路表达水平的影响
4 讨论
总结与展望
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间发表的论文
江苏大学;
