胰岛素生长因子2甲基化对高糖诱导滋养层细胞凋亡及PI3K/Akt通路的影响

摘要

目的 探究胰岛素生长因子2(IGF-Ⅱ)甲基化对高糖诱导滋养层细胞凋亡及PI3 K/Akt通路的影响.方法 体外培养人绒毛膜滋养层细胞系HTR-8/SVneo,随机分为对照组、高糖组、5-杂氮-2'-脱氧胞苷(甲基转移酶抑制剂,5-azadc)+高糖组(葡萄糖浓度为50 mmol/L),高糖组及5-aza-dc+高糖组以高糖培养基培养,5-aza-dc+高糖组以5-aza-dc处理后,以巢式甲基化特异性聚合酶链式反应(nMS-PCR)检测各组细胞IGF-Ⅱ甲基化水平;以CKK-8法检测各组细胞增殖情况;以流式细胞技术检测各组细胞凋亡情况,计算细胞相对存活率及凋亡率;以Western blot法检测各组细胞IGF-Ⅱ蛋白、凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、caspase-3)、PI3K/Akt通路蛋白(PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt)表达情况.结果 与对照组相比,高糖组细胞相对存活率、IGF-Ⅱ、Bcl-2、p-PI3K、p-Akt蛋白表达降低(P＜0.05),IGF-Ⅱ甲基化水平、细胞凋亡率、Bax、caspase-3蛋白表达升高(P＜0.05),PI3K、Akt蛋白表达无变化(P＞0.05);与高糖组相比,5-aza-dc+高糖组细胞相对存活率、IGF-Ⅱ、Bcl-2、p-PI3K、p-Akt蛋白表达升高(P＜0.05),IGF-Ⅱ甲基化水平、细胞凋亡率、Bax、caspase-3蛋白表达降低(P＜0.05),PI3K、Akt蛋白表达无变化(P＞0.05).结论 IGF-Ⅱ甲基化介导高糖诱导的滋养层细胞凋亡,抑制其甲基化可促进滋养层细胞增殖,抑制细胞凋亡,可能是通过上调PI3K/Akt通路实现的.