滋养层细胞

摘要： 目的 探讨微小RNA-433(miR-433)在子痫前期(PE)患者中的表达水平及其潜在的生物学功能.方法 收集25例健康者和23例子痫前期患者的胎盘组织.采用qRT-PCR检测miR-433在PE患者胎盘组织和正常胎盘组织中的表达差异.在滋养层细胞HTR-8/SVneo中过表达或抑制miR-433构建稳定细胞系,通过划痕试验和迁移侵袭试验检测miR-433对细胞迁移和侵袭的影响.采用Targetscan和miRanda预测miR-433直接作用的靶基因,通过qRT-PCR、Western blot和双荧光素酶报告基因检测试验进行验证,初步探究miR-433在PE中发挥作用的可能机制.结果 在PE患者胎盘组织中miR-433的表达高于正常胎盘组织.抑制miR-433可促进滋养层细胞的迁移和侵袭能力,而过表达miR-433可抑制细胞的迁移和侵袭能力.双荧光素酶报告基因检测试验结果 显示,过表达miR-433可以抑制JNK1的表达.在过表达miR-433的细胞中增加JNK1的表达可以逆转miR-433对细胞迁移和侵袭能力的抑制作用.结论 miR-433可能通过靶向JNK1影响滋养层细胞的迁移和侵袭来参与PE的进展,为了解PE的病因和发病机制提供了一个新的视角,同时为PE的早期预测和诊断提供了新的方向.

摘要： 目的 探讨黄芩苷通过调控miR-451对高糖诱导滋养层细胞损伤保护作用及机制。方法 采用葡萄糖(5.5、25 mmol/L)和黄芩苷(25、100μmol/L)处理人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/Svneo,随机分为对照组、高糖组、高糖+黄芩苷低剂量组、高糖+黄芩苷高剂量组。将anti-miR-NC和anti-miR-451转染后,用葡萄糖(25 mmol/L)处理,作为高糖+anti-miR-NC组和高糖+anti-miR-451组;将miR-NC和miR-451转染后,用葡萄糖(25 mmol/L)和黄芩苷(100μmol/L)处理,作为高糖+黄芩苷+miR-NC组和高糖+黄芩苷+miR-451组。采用CCK8和流式细胞术检测细胞活性和凋亡,Western blot检测cleaved-caspase3、Bax蛋白表达,试剂盒检测MDA水平及LDH、SOD活性;RT-qPCR检测miR-451表达。结果 与对照组比较,高糖组细胞活性、SOD活性降低(P<0.05),细胞凋亡率、LDH活性、MDA水平、cleaved-caspase3和Bax蛋白表达、miR-451表达升高(P<0.05);与高糖组比较,高糖+黄芩苷低、高剂量组上述指标均得到改善。与高糖+anti-miR-NC组比较,细胞活性、SOD活性升高(P<0.05),细胞凋亡率、LDH活性、MDA水平、cleaved-caspase3和Bax蛋白表达、miR-451表达降低(P<0.05)。与高糖+黄芩苷+miR-NC组比较,高糖+黄芩苷+miR-451组细胞活性、SOD活性升高(P<0.05),细胞凋亡率、LDH活性、MDA水平、cleaved-caspase3和Bax蛋白表达、miR-451表达降低(P<0.05)。结论 黄芩苷可抑制高糖诱导人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/Svneo的凋亡和氧化应激,促进细胞的活力,可能与下调miR-451表达有关。

摘要： 【目的】为研究奶牛胎盘发育提供基础依据。【方法】使用CoCl_(2)构建奶牛胎盘滋养层细胞低氧模型,并筛选出试验所需最适CoCl_(2)浓度;实时荧光定量PCR方法检测低氧对胎盘滋养层细胞胎盘生长因子(Placental growth factor,PLGF)mRNA表达的影响;显微镜观察低氧对Transwell小室中细胞迁移和浸润能力的影响;采用蛋白质印迹法(Western Blot)检测细胞中E-钙黏蛋白(E-Cadherin)的表达。【结果】通过检测细胞中低氧诱导因子-1α表达量确定试验所需的最适CoCl_(2)浓度为200μg/mL;Transwell小室法检测发现,低氧环境下细胞增殖缓慢,伪足数量和合胞体数量减少,迁移减缓,迁移率下降;实时荧光定量PCR结果显示,PLGF mRNA的表达并不受氧分压变化的影响;Western Blot结果显示E-Cadherin的表达量在低氧环境下表现出显著下降趋势。【结论】低氧能够抑制奶牛胎盘滋养层细胞的增殖、迁移与E-Cadherin的表达,但对PLGF mRNA的表达无显著作用。

摘要： 泛素化与去泛素化修饰通过调节细胞内蛋白质水平及活性而广泛参与机体的各类生理活动。正常妊娠过程有赖于母胎界面微环境稳态的建立和维持,涉及滋养层细胞、蜕膜基质细胞和蜕膜免疫细胞的增殖、分化、迁移、侵袭、极化、吞噬、分泌等生理活动的精细调控。已有研究证实,泛素-蛋白酶体系统(UPS)在这些细胞生理活动的调控中发挥着重要作用,其功能紊乱则可能导致复发性自然流产(RSA)、子痫前期(PE)等妊娠相关疾病的发生。本文就母胎界面蛋白质泛素化修饰的作用及其与不良妊娠结局相关性的研究进展进行综述,以期为生殖领域基础医学的研究提供参考。

摘要： 目的探讨钩藤碱对人绒毛膜滋养层细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其可能的机制。方法体外培养人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/Svneo,采用低、高剂量钩藤碱进行干预,同时设空白对照,采用细胞计数法(CCK-8)、流式细胞术、划痕和Transwell侵袭实验检测钩藤碱对HTR-8/Svneo细胞增殖活力、周期分布、迁移和侵袭的影响,RT-qPCR和Western blot检测法上皮间质转化(EMT)标志分子上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达,Western blot法检测NF-κB p65表达和IκBα磷酸化表达。结果与空白对照组比较,钩藤碱干预后HTR-8/Svneo细胞增殖活力升高,细胞迁移率增加,侵袭细胞数增多,G_(0)/G_(1)期细胞比例减少,S期细胞比例增多,E-cadherin表达降低,而N-cadherin和Vimentin表达升高,NF-κB p65表达和IκBα磷酸化表达上调,差异均有统计学意义(P<0.01);与钩藤碱低剂量组比较,钩藤碱高剂量组作用效果更优(P<0.01)。结论钩藤碱能够促进滋养层细胞增殖、侵袭和迁移能力,其作用机制可能与激活NF-κB信号通路有关。

摘要： 为探讨单增李斯特菌(Lisetria monocytogenes,LM)诱导小鼠滋养层细胞炎性体激活在其致小鼠流产中的作用,在体外用LM处理小鼠滋养层细胞,观察LM在细胞内的分布,检测培养基中白细胞介素(interleukin,IL)-1β水平和细胞裂解液中天冬氨酸蛋白水解酶1(cysteinyl aspartate specific proteinase 1,caspase 1)成熟片段水平以及乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放量.结果显示:LM分布在细胞核周围,LM感染组细胞培养基中IL-1β水平、细胞裂解液中caspase 1成熟片段水平以及LDH释放量与对照组相比明显增加,溶血素O(listeriolysin O,LLO)缺陷型LM(Δhly LM)感染组IL-1β水平和caspase 1成熟片段水平明显低于野生型LM感染组.因此推测,LM可通过LLO诱导小鼠滋养层细胞炎性体的激活进而诱导IL-1β的分泌和滋养层细胞焦亡导致流产的发生,这可为临床防治LM诱导的流产提供科学依据.

摘要： 目的探讨丙泊酚对滋养层细胞活力及侵袭能力的影响,及对血管内皮生长因子(VEGF)/基质金属蛋白酶-9(MMP-9)信号通路的调控作用。方法取人类绒毛外滋养层细胞株HTR8-SVneo细胞,用不同浓度丙泊酚(0~200μmol/L)处理72 h,检测细胞活力、MMP-9、VEGF表达水平;取100μmol/L丙泊酚处理8~72 h,检测细胞活力、MMP-9、VEGF表达水平。将HTR8-SVneo细胞分为对照组、丙泊酚组(100μmol/L处理24 h)、ad-VEGF组(转染VEGF过表达序列腺病毒载体)、ad-NC组(转染不含ad-VEGF序列的腺病毒空载体)、丙泊酚+ad-VEGF组(丙泊酚处理+转染ad-VEGF);MMT法检测细胞活力;改良版基底膜基质Boyden室测定细胞侵袭能力;免疫荧光法检测VEGF、MMP-9阳性表达;免疫细胞化学染色法检测微血管密度生成标志物CD34阳性表达水平;Western blot法测定侵袭相关蛋白人类白细胞抗原G(HLA-G)、苹果酸脱氢酶(MDH)、细胞骨架相关蛋白(prefoldin 1)的表达。结果不同浓度丙泊酚处理72 h及100μmol/L丙泊酚处理不同时间,可剂量及时间依赖性降低HTR8-SVneo细胞活力及MMP-9、VEGF表达。过表达VEGF可提高HTR8-SVneo细胞活力及侵袭能力、促进VEGF/MMP-9通路蛋白及侵袭相关蛋白表达(均P<0.05),且ad-VEGF具有逆转丙泊酚抑制细胞活力及侵袭能力的作用(均P<0.05)。结论丙泊酚可能通过抑制VEGF/MMP-9通路蛋白表达,进而抑制滋养层细胞增殖活力及侵袭能力。

摘要： 子痫前期是一种妊娠特异性疾病,孕产妇死亡率较高,目前关于其发病机制尚不明确。众所周知,高血压和蛋白尿是该疾病的两大临床表现,同时伴随着全身器官功能障碍。子痫前期的发生始于胎盘异常,随后体内释放的抗血管生成因子受体和可溶性内皮糖蛋白(soluble endoglin,SEng)会导致内皮功能障碍,进一步造成子宫螺旋动脉灌注不良和缺氧,最终导致母体和胎儿发生不良结局。本文将从血管内皮损伤、滋养细胞侵袭异常、免疫学因素、遗传因素四方面进行综述,全面阐述了子痫前期的发病机制。

摘要： 目的:探讨微小RNA-101(miR-101)和髓细胞白血病因子-1(MCL1)在子痫前期(PE)中的表达及对胎盘滋养层细胞增殖、凋亡及侵袭的影响。方法:收集2018年6月至2020年12月在郑州大学第二附属医院妇产科就诊的56例PE孕妇(PE组)和60例正常孕妇(对照组)的相关资料,采用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测其胎盘组织中miR-101的相对表达水平,蛋白免疫印迹法及免疫组织化学法检测MCL1的表达,分析二者表达的相关性;采用双荧光素酶报告基因实验验证人滋养层细胞HTR8/SVneo中miR-101与MCL1的靶向关系;通过转染分别抑制HTR8/SVneo细胞中miR-101和MCL1的表达,并采用CCK8法、流式细胞仪及细胞侵袭实验检测细胞增殖、凋亡及侵袭能力的变化。结果:PE组胎盘组织中miR-101水平明显高于对照组,MCL1蛋白水平明显低于对照组(P<0.05),且二者表达呈负相关(r<0,P<0.05);miR-101与MCL1之间存在靶向关系,体外抑制miR-101后HTR8/SVneo细胞的增殖和侵袭活性升高,凋亡率下降(P<0.05),与单独抑制miR-101相比,共抑制miR-101和MCL1的表达后细胞的增殖和迁移能力降低,凋亡率升高(P<0.05)。结论:miR-101在PE胎盘组织中高表达,并通过靶向MCL1引起滋养层细胞增殖、浸润不足和异常凋亡,参与PE的发生进展。

摘要： 目的探讨富含AT的相互作用结构域蛋白1A(AT-rich interactive domain 1A,ARID1A)对子痫前期(preeclampsia,PE)滋养层细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响及潜在分子机制。方法采用RT-qPCR及Western blot测定30例PE患者及30例正常妊娠者胎盘组织中ARID1A表达情况。以人绒毛滋养层细胞HTR-8/SVneo为研究对象,实验分组为:control组(无处理)、NC组(转染空载体)、ARID1A组(转染ARID1A过表达载体)、ARID1A+氯化锂(LiCl)组(转染ARID1A过表达载体后再用50 mmol/L的LiCl处理)。采用MTT法检测细胞增殖,采用Transwell实验检测细胞侵袭能力和迁移能力,采用RT-qPCR及Western blot法检测胎盘组织中ARID1A的mRNA和蛋白表达水平,采用Western blot法检测HTR-8/SVneo细胞中ARID1A、MMP-2、MMP-9、Wnt1、β-catenin和Cyclin D1的蛋白表达水平。结果PE患者胎盘组织中ARID1A的表达水平显著高于正常胎盘组织(P<0.05)。与control组相比,ARID1A组细胞增殖、侵袭、迁移能力显著降低(P<0.05),MMP-2、MMP-9、Wnt1、β-catenin和Cyclin D1蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与ARID1A组相比,ARID1A+LiCl组Wnt1、β-catenin和Cyclin D1蛋白表达水平显著升高(P<0.05),细胞侵袭和迁移能力显著升高(P<0.05)。结论ARID1A在PE胎盘组织中高表达,ARID1A可能通过Wnt/β-catenin信号通路抑制滋养层细胞的侵袭和迁移。

摘要： 苯并芘(BaP)是多环芳烃中的典型代表,广泛存在于各种环境中,在体内可代谢为BPDE,导致各种毒性.BaP可引起子痫、子宫内生长受限、流产等相关疾病.在胚胎发育过程中,绒毛膜外滋养层细胞迁移并侵袭子宫蜕膜.侵袭迁移不足将引发子痫前期(PE)、子痫等不良妊娠结局:而过度侵袭则会引发侵袭性葡萄胎和绒毛膜癌等疾病.目前,关于BaP是否会影响滋养层细胞的功能、迁移和侵袭能力、以及相应的分子机制并不清楚.

摘要： 滋养层细胞是构成胎盘屏障的重要组成部分,也是某些病原微生物的主要靶细胞.但是,原代滋养层细胞的增殖能力随着传代次数的增加而逐渐降低,限制了某些持续性研究的开展.本研究将携带有人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因的pCI-neo-hTERT质粒导入到原代猪胎盘滋养层细胞内(Porcine placental trophoblast cells,PTCs),建立永生化的猪胎盘滋养层细胞(hTERT-PTCs),为研究猪繁殖障碍相关疾病提供细胞模型.研究结果表明，通过转染外源性的hTERT基因可以使猪胎盘滋养细胞获得永生化，永生化的猪胎盘滋养细胞能够保留与原代滋养层细胞基本一致的关键生物学特性和功能，并且没有获得肿瘤转化特性，符合细胞建系要求，可以作为研究母猪繁殖障碍性疾病致病机制的细胞模型。

摘要： 滋养层细胞在胚胎着床和胎盘形成过程中发挥重要作用,很多致病因素能够引起滋养层细胞的功能紊乱导致胚胎着床失败或流产,获得一株能够稳定传代的山羊滋养层细胞用于体外研究具有十分重要的意义。本研究分离、纯化原代山羊滋养层细胞,转染携带有hTERT基因的质粒永生化原代细胞,并进行传代培养。结果显示,hTERT转染的山羊滋养层细胞(hTERT-GTCs)能够持续表达端粒酶基因并且呈现出高的端粒酶活性,连续增殖到50代而不表现出衰老迹象。永生化的山羊滋养层细胞能够特异性表达细胞角蛋白7(CK-7),分泌绒毛膜促性腺激素β亚基(CG-β)和胎盘催乳素(PL).进一步研究发现,永生化的山羊滋养层细胞可以表达波形蛋白和非经典的组织相容性一类抗原(MHC-Ⅰ),同时呈现出侵袭性,说明永生化的细胞为绒毛外滋养层细胞。永生化的山羊滋养层细胞系不表现出肿瘤转化特性。本研究通过转染hTERT基因永生化的山羊绒毛外滋养层细胞保持了原代滋养层细胞的生物学特征,可以作为后续研究的试验模型。

摘要： 为了体外获得高纯度的绵羊绒毛膜滋养层细胞，为后续的细胞转染和RNA干扰试验提供细胞基础。本试验经过培养不同孕期（早、中、晚）蒙古绵羊滋养层细胞，通过分析胎盘的采集时间对细胞的贴壁率及细胞活性的影响，确定采集胎盘的最佳时期为孕中期。通过添加不同浓度的血清，筛选出含15%胎牛血清的DMEM培养体系较好，细胞形态及生物特性保持不变，细胞生长速度及增殖能力无明显差异。采用组织块法培养滋养层细胞，消化差速法纯化细胞，纯化后的细胞经H.E染色，观察到细胞呈多角形或卵圆形，细胞界限清晰，胞浆透明，核圆形或呈小泡状。免疫组织化学方法分别检测不同孕期正常绵羊胎盘绒毛组织，以及来源于绒毛组织的体外培养的滋养层细胞，结果显示细胞角蛋白染色呈阳性反应，波形蛋白染色呈阴性反应，表明细胞性质为上皮来源的绒毛膜滋养层细胞，且纯度达90%以上，符合后续的实验要求。透射电子显微镜观察体外培养的滋养层细胞．结果显示所培养细胞膜外有微绒毛，胞质内有丰富的线粒体、游离核糖体和多聚核蛋白体，高尔基复合体明显，位居核旁，核大，核内异染色质分散，胞质内还可见电子密度高的脂滴和膜包颗粒等滋养层细胞的典型结构。RT-PCR技术检测到体外培养的滋养层细胞能表达该细胞所分泌的特有的滋养层蛋白-1基因片段。证实该方法可以有效获得较高纯度的、具有生物学活性的绵羊绒毛膜滋养层细胞，为本实验室后续的体外研究提供试验基础。

摘要： 目的：研究TH1、TH2型细胞因子对人早孕滋养层细胞绒毛膜促性腺激素(HCG)分泌及其PCNA和Bcl-2表达的影响。方法：采用人工流产方法提取绒毛膜组织,加人不同剂量hrIFN-γ和hrIL-4做短期组织培养,采用125I放射免疫法检测上清液中HCG含量。应用免疫组织化学法检测绒毛膜组织滋养层细胞PCNA和Bcl-2蛋白表达。结果：HrIFN—γ对滋养层细胞HCG的分泌具有抑制作用,hrlL-4对滋养层细胞HCG的分泌具有促进作用。hrIFN-γ处理的滋养层细胞PCNA和Bcl-2表达均较对照组弱;hrIL-4处理的滋养层细胞PCNA和Bcl-2表达较对照组增强。结论：HrIFN-γ抑制滋养层细胞的增殖,hrIL-4促进滋养层细胞的增殖,外源性TH1／TH2型细胞因子对滋养层细胞具有免疫调节作用。

摘要： 目的：研究TH1、TH2型细胞因子对人早孕滋养层细胞绒毛膜促性腺激素(HCG)分泌及其PCNA和Bcl-2表达的影响。rn 方法：采用人工流产方法提取绒毛膜组织，加入不同剂量hrIFN-γ和hrIL-4做短期组织培养，采用125I放射免疫法检测上清液中HCG含量。应用免疫组织化学法检测绒毛膜组织滋养层细胞PCNA和Bcl-2蛋白表达。rn 结果：HrIFN-γ对滋养层细胞HCG的分泌具有抑制作用，hrIL-4对滋养层细胞HCG的分泌具有促进作用。hrIFN-γ处理的滋养层细胞PCNA和Bcl-2表达均较对照组弱：hrIL-4处理的滋养层细胞PCNA和Bcl-2表达较对照组增强。rn 结论：HrIFN-γ抑制滋养层细胞的增殖，hrIL-4促进滋养层细胞的增殖，外源性TH1/TH2型细胞因子对滋养层细胞具有免疫调节作用。

摘要： 本文以人绒毛膜癌细胞系JEG-3为体外研究模型,以o, p-DDT为研究对象,利用高效液相手性拆分获得o,p-DDT对映体标样,结合分子生物学实验技术研究了DDT及其对映体对JEG-3细胞激素分泌及其受体调节的影响。评价DDT对映体对滋养层细胞功能影响的对映体选择性差异。

摘要： 我国属HCV高感染地区，每年因宫内感染而出生的新生儿估什有几万人，这些人不仅是HCV感染的主要传染源，同时又是肝硬化，肝癌的高危人群。在日前丙型病专性肝炎缺乏特效药物治疗的情况下，研究HCV宫内感染的确切机制，在此基础上采取相应的预防措施，有效的阻断HCV母婴传播是降低HCV危害性的一个重要手段。本研究提供了HCV体外感染人胎盘滋养层细胞具体方式的形态学资料，对HCV宫内传播机制的进一步研究有着重要的参考意义。

摘要： 随着人类生育力的下降,受到不孕不育症困扰的夫妇呈逐年增加趋势,很大一部分患者寻求辅助生殖技术(assisted reproductive technology,ART)的帮助来实现家庭梦想.优质胚胎顺利着床是成功妊娠的关键环节.在众多影响和调控胚胎植入的因子中,趋化因子受体4(C-X-C chemokine receptor4,CXCR4)的作用不可小觑.本研究通过检测、比较和分析植入成功(successful implantation，SI)与植入失败(failed implantation，FI)组经ART后胚胎中CXCR4的表达情况，结合基础实验来推测和揭示CXCR4在胚胎着床中的作用。CXCR4在胚胎植入时可能通过调控滋养层细胞中的凋亡通路来影响胚胎的迁移，从而调控胚胎植入。CXCR4也许可以成为ART中胚胎植入能力评估的潜在标志物。

摘要： 在哺乳动物胚胎发生过程中滋养层细胞的分化是首次分化事件,对胎盘的形态和生理起着重要作用.利用含有两个小分子抑制剂的培养系统，成功地从牛体外受精囊胚获得牛滋养层干细胞样细胞.这些细胞可以在添加B27,N2,Glutamax和2inhibitors(PD0325901,CHIR99021)的DMEM/F12和NeuralBasal培养液的培养体系中连续增殖,形成圆顶形囊泡结构,碱性磷酸酶染色呈阳性,表达OCT4,SOX2,NANOG,CDX2,CK18,SSEA-1,SSEA-4,TRA-1-60和TRA-1-81等胚胎干细胞和滋养层干细胞标志因子,注射到NonScid小鼠体内可以形成包含外胚层,中胚层和成熟滋养层细胞的畸胎瘤.基因表达谱芯片分析显示,这些细胞表达滋养层干细胞和滋养层细胞标记基因如,ETS2,ELF5,SMARCA4,HSD17B1,CYP11A1,PPARG,Id2,GCM1,HAND1和THAP11.但是典型的多能基因如OCT4,SOX2和NANOG表现明显的下调,而滋养层干细胞标志基因CDX2等表现明显的上调.

摘要： 本发明涉及一种用于分离滋养层细胞的核酸适配体、利用该核酸适配体分离滋养层细胞的方法以及利用该方法获得的滋养层细胞进行染色体拷贝数变异分析的方法，具体如下：先从宫颈脱落细胞中分离和纯化胎盘滋养层细胞，以滋养层细胞为起始样本提取胎儿来源的核酸，并利用数字PCR技术分别对目标易变染色体和参比染色体上特定单拷贝基因的拷贝数进行定量，通过分析两者比值来确定目标易变染色体的拷贝数变异特征。本发明选择特定序列的核酸适配体，配合免疫磁珠进行滋养层细胞的分离，极大缩短样本的处理时间，并利用数字PCR技术检测，设计特有的引物和探针，降低对PCR扩增效率的影响，因此与传统方法相比，该方法简便高效、快速准确。

摘要： 本发明公开了一种牛囊胚内细胞团细胞和滋养层细胞的差异染色方法，包括以下步骤：1)利用免疫染色方法，以抗CDX2单克隆抗体作为一抗，将其与特异表达在牛囊胚滋养层细胞的CDX2分子进行免疫结合；2)利用免疫染色方法，以红色荧光标记的能够与抗CDX2单克隆抗体结合的抗体作为二抗，对清洗后的结合有一抗的牛囊胚进行免疫染色；3)在免疫染色完成后，对牛囊胚进行整体的细胞核荧光染色，以形成差异染色。本发明在CDX2蛋白在滋养层细胞内特异性表达，而在内细胞团细胞上不表达的基础上，这样利用基于CDX2分子的红色免疫染色和DAPI细胞核蓝色染色来进行差异染色，准确率为100％，而且图片清晰漂亮。

摘要： 本申请涉及基因工程的技术领域，具体公开了一种滋养层细胞及其在扩增人NK细胞中的应用。该滋养层细胞，表达细胞因子，所述细胞因子包括CD80、CD70、CD86、4‑1BBL、CD40、CD58、CD83和MICA；所述滋养层细胞为NIH 3T3细胞；以及用于制备该滋养层细胞的细胞因子慢病毒载体及利用细胞因子慢病毒载体制备的细胞因子慢病毒；以及利用该滋养层细胞制备的NK细胞扩增培养基；以及该滋养层在扩增NK细胞中的应用。本申请制备的NK细胞具有更好的安全性和理想的杀伤数据。

摘要： 本发明公开了一种从孕妇宫颈脱落细胞中分离胎盘滋养层细胞的方法。该方法基于研究确定的滋养层细胞表面或胞内表达的特异性抗原及组合，并利用设计的微流控分选芯片或流式细胞仪，对胎盘滋养层样本的细胞悬浮液进行细胞分选，获得分离纯化的胎盘滋养层细胞。本发明与传统方法相比，具有无创获取标本和特异性好的优势，而且该方法取材时间较早，导致感染及流产的风险低，能实现同时对多个抗原进行同步标记和特征荧光信号的识别和分选，准确性得到较大提升，检测结果又具有更高的可信度和更广的覆盖范围。

摘要： 本发明涉及一种用于分离滋养层细胞的核酸适配体、利用该核酸适配体分离滋养层细胞的方法以及利用该方法获得的滋养层细胞进行染色体拷贝数变异分析的方法，具体如下：先从宫颈脱落细胞中分离和纯化胎盘滋养层细胞，以滋养层细胞为起始样本提取胎儿来源的核酸，并利用数字PCR技术分别对目标易变染色体和参比染色体上特定单拷贝基因的拷贝数进行定量，通过分析两者比值来确定目标易变染色体的拷贝数变异特征。本发明选择特定序列的核酸适配体，配合免疫磁珠进行滋养层细胞的分离，极大缩短样本的处理时间，并利用数字PCR技术检测，设计特有的引物和探针，降低对PCR扩增效率的影响，因此与传统方法相比，该方法简便高效、快速准确。

摘要： 一种以工程化红细胞作为滋养层细胞体外高效扩增NK细胞的方法，属于细胞基因治疗领域，包括使用低浓度戊二醛醛化红细胞表面蛋白，并在红细胞表面标记多种不同蛋白组合，包括IL‑15,4‑1BB，CD335单抗以及CD2单抗等，使用工程化红细胞作为滋养层细胞在体外反复刺激PBMC可以产生大量NK细胞，以工程化红细胞作为滋养层细胞体外高效扩增NK细胞具有如下优点：一、避免了K562等肿瘤细胞系的使用能够确保NK细胞制备过程更加安全，二、使用工程化红细胞反复刺激能够在体外获得大量高杀伤活性NK细胞，获得NK细胞数量比使用因子法能够增加30%以上。此种制备安全足量的NK细胞方法能够更加符合临床使用需求。

摘要： 本发明公开了一种牛囊胚内细胞团细胞和滋养层细胞的差异染色方法，包括以下步骤：1)利用免疫染色方法，以抗CDX2单克隆抗体作为一抗，将其与特异表达在牛囊胚滋养层细胞的CDX2分子进行免疫结合；2)利用免疫染色方法，以红色荧光标记的能够与抗CDX2单克隆抗体结合的抗体作为二抗，对清洗后的结合有一抗的牛囊胚进行免疫染色；3)在免疫染色完成后，对牛囊胚进行整体的细胞核荧光染色，以形成差异染色。本发明在CDX2蛋白在滋养层细胞内特异性表达，而在内细胞团细胞上不表达的基础上，这样利用基于CDX2分子的红色免疫染色和DAPI细胞核蓝色染色来进行差异染色，准确率为100％，而且图片清晰漂亮。

摘要： 本文公开了体外产生的前体调节性细胞滋养层细胞及其组合物。本文还公开了通过利用本文公开的细胞治疗障碍或病症的方法。

摘要： 本申请涉及基因工程的技术领域，具体公开了一种滋养层细胞及其在扩增人NK细胞中的应用。该滋养层细胞，表达细胞因子，所述细胞因子包括CD80、CD70、CD86、4‑1BBL、CD40、CD58、CD83和MICA；所述滋养层细胞为NIH 3T3细胞；以及用于制备该滋养层细胞的细胞因子慢病毒载体及利用细胞因子慢病毒载体制备的细胞因子慢病毒；以及利用该滋养层细胞制备的NK细胞扩增培养基；以及该滋养层在扩增NK细胞中的应用。本申请制备的NK细胞具有更好的安全性和理想的杀伤数据。

摘要： 本实用新型公开了一种小鼠滋养层细胞与体外蜕膜化细胞共培养皿防护装置，包括防护罩、培养皿、固定杆和安装壳体，所述防护罩内部设有一层银离子抗菌层，所述防护罩底部一圈通过减震弹簧连接安装有底部支撑板，所述防护罩内部设有培养皿，所述培养皿底部设有一层橡胶防滑垫层，所述防护罩内部顶部固定安装有安装壳体，所述安装壳体内部设有紫光灭菌灯管。本实用新型通过防护罩对外界进行防护，避免灰尘碎屑落入培养皿中，避免影响细胞培养，同时防护罩内部的顶部固定安装的安装壳体内部设有紫光灭菌灯管，对防护罩内部空气进行灭菌处理，同时可对清洗后的培养皿进行紫光消毒灭菌，提升了该防护罩的防护效果。