油菜菌核病致病性分化及其与胞壁降解酶活性关系的研究

摘要

油菜菌核病是一种世界性的油菜病害，在世界油菜生产国和地区均有分布。在我国也有发生，位于油菜三大病害之首，尤其以长江流域和东南沿海地区最为普遍和严重，严重影响了油菜产量和品质。本论文以采集于安徽不同市县的24株油菜菌核病菌株为供试菌株，以甘蓝型油菜陕油8号和沪油15号为供试油菜品种，采用牙签菌丝体接种法测定油菜菌核病的致病性。通过比较发病时病斑长度来评价不同菌系的致病能力。采用DNS（3，5-二硝基水杨酸）法测定上述24株菌株的胞壁降解酶纤维素酶和果胶酶活力，考察致病性与纤维素酶和果胶酶是否具有相关性。主要结果如下：
　　 1.不同地区的油菜菌核病致病性分化研究
　　 从安徽省桐城、无为、宁国、旌德、寿县等5个市县采集菌核，分离鉴定并选取其中的24株菌株作为供试菌株，在供试油菜5、6叶期，采用牙签菌丝体接种法接种测定菌株对感、抗两品种油菜的致病力。实验表明，来源于各个地区的菌株具有明显的致病性，所有接种油菜植株均发病，症状明显。各菌株间的致病力有明显的差异，存在着明显分化，这种致病性差异与菌株的地理来源有很大的联系，但相不完全相关，任何一个地区都有致病性强和弱的菌株。
　　 2.油菜菌核病纤维素酶活性与致病力的关系
　　 采用DNS法测定供试菌株的纤维素酶活性。纤维素酶分解组织得到低分子还原糖。还原糖与显色剂DNS在碱性条件下反应得到红棕色的络合物。在一定的浓度下，吸光度与糖浓度呈现正相关，据此可以测得致病酶的含量。结果显示：油菜菌核病菌不同菌株的纤维素酶活有较大差异，且酶活值大小与菌株致病力强弱密切相关。
　　 将菌株接种所致的病斑长度（y）与纤维素酶活值（x）两因子进行了相关分析，结果表明，供试菌株纤维素酶活性与菌株所致病斑长度之间的相关性显著，菌株的纤维素酶活性越高，其致病力也越强。供试菌株接种陕油8号品种油菜24h后，纤维素酶活与致病力的相关系数为0.9060，y=13.208x-1.6134；接种48h后所致病力与纤维素酶活的相关系数为0.9444，y=25.944x-3.2497。
　　 供试菌株接种沪油15号品种油菜24h后，纤维素酶活与致病力的相关系数为0.5046，y=9.106x-0.8319；接种48h后致病力与纤维素酶活的相关系数为0.5545，y=26.887x-2.8857。
　　 3.油菜菌核病果胶酶活性与致病力的关系
　　 采用DNS法测供试菌株果胶酶活性，测定方法及原理与测定纤维素酶相似。测得的结果表明：油菜菌核病病原菌会产生大量的果胶酶，油菜菌核病的致病性果胶酶存在一定的相关性。
　　 对菌株接种所致的病斑长度（y）与果胶酶活值（x）两因子进行了相关分析，结果表明油菜菌核病致病性与果胶酶活性也呈正相关，呈线性递增趋势。在陕油8号油菜品种上，供试菌株接种24h后，致病力与果胶酶酶活相关系数为0.5927，y=0.0615x-0.2135；接种48h后，致病力与相应果胶酶活值相关系数为0.5496，y-26.887-2.8857。
　　 在抗病性较强的沪油15号油菜品种上，供试菌株接种24h后，致病力与酶活值的相关系数为0.7130，y=0.2266-2.6439；接种48h后，致病力与相应果胶酶活值相关系数为0.6596，y=0.0847x-0.922。

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论文说明：图表目录

声明

文献综述

1油菜菌核病发生及防治

1.1油菜菌核病的危害

1.2油菜菌核病的病原菌生物学特性

1.3油菜菌核病的病害循环

1.4油菜菌核病的综合治理

2油菜菌核病菌致病性分化

3油菜菌核病菌的致病过程及致病机理

3.1致病过程

3.2致病机理

4纤维素酶和果胶酶活性测定的方法及原理

4.1纤维素酶活测定方法及原理

4.2果胶酶活测定方法及原理

引言

材料和方法

1试验材料

1.1供试菌株

1.2供试油菜品种

1.3培养基

1.4试验试剂

1.5实验器材

2.试验方法

2.1致病性测定

2.2纤维素酶活的测定

2.3果胶酶活的测定

结果和分析

1不同地区的油菜菌核病菌株对油菜的致病力

1.1油菜菌核病接种后症状观察

1.2油菜菌核病菌在陕油8号油菜的致病性

1.3油菜菌核病菌在沪油15号油菜的致病性

1.4菌株对油菜的致病性与其地理来源的关系

2油菜菌核病菌的纤维素酶酶活性

2.1葡萄糖溶液标准曲线

2.2供试菌株的纤维素酶活性测定结果

3油菜菌核病菌果胶酶活性

3.1 D-半乳糖醛酸标准曲线制作

3.2供试菌株的果胶酶活性测定结果

4不同地区油菜菌核病致病性与细胞降解酶活性的相关性分析

4.1纤维素酶活性与致病性相关性的分析

4.2果胶酶活性与致病性相关性的分析

讨论

结论

参考文献

致谢

个人简介

攻读硕士学位期间已发表的学术论文