茶树上冰核活性细菌的分离、鉴定及防治

摘要

冰核活性细菌（ice nucleation active bacteria，简称INA细菌）是自然界广泛存在的一类微生物，在没有冰核活性细菌存在的条件下，植物可以耐受6~7℃的低温而不发生冻害，而当冰核活性细菌存在于植物上时，可在2~3℃下被诱发植物细胞水结冰而发生霜冻，。这证明了冰核细菌是诱发和加重植物霜冻的重要因素。
　　 茶树原产于我国西南较为温暖湿润的地带，抵御低温的能力不强。在INA细菌存在的情况下，其对低温的抵御能力更加弱。从微生物的角度研究茶树抗寒性为茶树抗冻提供了一种重要的途径。本实验通过对一株从茶树上分离的冰核活性细菌进行鉴定、药剂防除以及拮抗菌防治，从茶树微生物的角度为茶树抗冻提供理论依据。
　　 本实验于2009年11月气温降低时从大杨店安徽农业大学实验基地茶园取样，取样范围覆盖整个茶园，不以茶树种类为取样标准。实验从样品中分离到一株INA细菌，该菌株在5℃下在2min内冻滴率达到85％，一个冰核产生需要的细胞数约为5.4×10 3个，该菌株具有较强的冰核活性。经总DNA提取，PCR扩增16SrDNA序列对比分析，该菌株与蔫短小杆菌（Curtobacteriumflaccumfaciens）具有极高的同源性，达到99％。
　　 根据GenBank上inaQ基因序列（登陆号：EU360731）保守序列设计引物，PCR扩增出冰核基因的片段，经GenBankBLAST比对证明与来自丁香假单胞菌丁香亚种（P．Syringae subsp.syringae)的inp基因具有较高同源性。在5℃条件下，抑菌圈实验结果为：次氯酸钙＞亚甲蓝＞Tween 80＞藏红；破坏INA细菌冰核活性物质效果为次氯酸钙最佳，其他几种试剂效果不明显；药剂触杀INA细菌结果为：次氯酸钙＞藏红＞亚甲蓝＞Tween80。结果与文献报道的含氯化合物抗INA细菌具有的效果一致。本实验在同一生态条件下的土壤中分离出一株拮抗菌，经PCR扩增16SrDNA反应与序列分析鉴定该菌株为黄孢原毛平革菌(Phanerochaetechrysosporium)。

目录

文摘

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论文说明:图表清单

声明

1.文献综述

2.引言

3 材料与方法

4 结果与分析

5 讨论

6 结论

参考文献

附录

致谢

作者简介

成果清单