热应激下鸡下丘脑HSP90和GPR23基因mRNA表达及SPNs监测

摘要

热应激是影响鸡生产性能的重要因子之一,本研究基于前期获得的基因芯片表达谱分析结果,针对已经筛查到的与鸡热应激相关的候选基因(HSP90,GPR23和ITGA8)开展进一步的功能研究。
　　1.持续热应激后恢复常温过程中HSP90与GPR23在不同群体中的mRNA表达情况:分别选取8周龄健康强健的淮南麻黄鸡(H)和文昌鸡(W)公鸡各126只,将室温快速提升至(35±1)℃并以此时作为热应激起始(0h),持续高温(35±1)℃处理72h后恢复正常室温(24±1℃)。采集两个品种高温处理0、12、24、72h及恢复常温后12、24、72h各时间点18只个体的下丘脑组织。利用荧光定量PCR技术,检测HSP90,GPR23基因在H和W下丘脑组织中各时间点的表达量变化情况。结果发现,HSP90持续高温72h至恢复常温72h过程中,在H和W下丘脑组织中的表达趋势相似:均表现为先上升后下降趋势,24h表达丰度最高,且HSP90在H下丘脑各时间点中的表达量均高于W。GPR23在H中的表达情况为:随着高温持续时间的延长,0-72h的表达量持续升高,72h表达量达到最高,室温恢复正常后12-72h,表达量逐渐降低。在W下丘脑中的表达量在高温处理的0-24h表达量急剧上升,24h达到最高峰(P<0.05),之后表达量呈逐渐下降的趋势。
　　2.SNPs检测:通过DNA直接测序的方法,对候选基因(HSP90、GPR23、ITGA8)的外显子及部分内含子区域进行SNP位点检测,分别在HSP90的W4-87、GPR23的A2-767G和ITGA8的A4-2798G位置各发现一个突变位点。通过比对发现HSP90W4-87位于第四外显子,但此位点的突变并未引起氨基酸的改变。其他两个突变位点分别位于GPR23的第2和ITGA8的第4内含子内。3个突变位点在H和W中均处于Hardy-Weinberg平衡状态。对各位点在H和W基因型差异比较分析中并未发现差异显著基因型(P>0.05)。
　　结论:HSP90、GPR23在H和W下丘脑中的表达量在持续高温处理后恢复常温过程中,均发生了规律性的变化,初步推断HSP90、GPR23与热应激调控有关,但具体分子机制有待进一步研究。

目录

封面

声明

中文摘要

英文摘要

目录

图表目录

缩略词表

文献综述

第一章 热应激下鸡下丘脑HSP90、GPR23基因mRNA表达

1.1引言

1.2材料与方法

1.3试验内容

1.4试验结果与分析

1.5讨论

1.6结论

第二章 热应激相关分子标记的筛选

2.1前言

2.2试验材料和方法

2.4 讨论

2.5 小结

全文结论

参考文献

致谢

作者简介

研究生阶段发表文章

附件A