第1 章 绪 论
1.1 课题研究的目的和意义
1.2 几丁质酶的研究进展
1.2.1 几丁质酶的分类
1.2.2 几丁质酶的性质
1.2.3 几丁质酶基因的克隆
1.2.4 几丁质酶基因的功能结构
1.2.5 几丁质酶的应用
1.3 微生物产几丁质酶的研究
1.3.1 产几丁质酶微生物的种类及分布
1.3.2 链霉菌产几丁质酶的研究
1.3.3 微生物产几丁质酶的发酵工艺研究进展
1.4 链霉菌的其他生物学价值
1.4.1 抑菌活性物质
1.4.2 抗肿瘤细胞毒活性物质
1.4.3 酶活性物质
1.5 本文的主要研究内容及技术路线
1.5.1 主要研究内容
1.5.2 技术路线图
第2 章 材料与方法
2.1.1 菌种的来源
2.1.2 实验材料与试剂
2.1.3 实验仪器与设备
2.1.4 实验试剂的配制
2.2 实验方法
2.2.1 菌种 EBI-001 的活化与传代
2.2.2 菌株 EBI-001 功能活性检测
2.2.3 菌株 EBI-001 形态学观察及培养特征
2.2.4 菌株 EBI-001 生理生化试验
2.2.5 菌株 EBI-001 基因组测序
2.2.6 菌株 EBI-001 产几丁质酶培养基配方优化
2.2.7 菌株 EBI-001 产几丁质酶发酵工艺优化
2.2.8 菌株 EBI-001 几丁质酶酶活性质初探
2.2.9 菌株 EBI-001 几丁质酶家族基因生物信息学分析
2.2.10 数据分析
第 3 章 菌株 EBI-001 菌种鉴定及基因组测序分析
3.1 菌株 EBI-001 菌株鉴定
3.1.1 菌株 EBI-001 的形态学特征观察
3.1.2 菌株 EBI-001 的培养特征观察
3.1.3 菌株 EBI-001 的生理生化特征测定结果
3.1.4 菌株 EBI-001 16S rDNA 序列分析结果
3.2 菌株 EBI-001 基因组二代测序分析
3.2.1 菌株 EBI-001 基因组框架分析
3.2.2 菌株 EBI-001 蛋白编码基因功能注释
3.2.3 菌株 EBI-001 次级代谢产物合成基因簇分析
3.3 菌株 EBI-001 抑菌活性研究
3.4 菌株 EBI-001 产几丁质酶活性研究
3.5 本章小结
第4 章 菌株EBI-001 产几丁质酶发酵优化
4.1 菌株产酶培养基优化
4.1.1 单因素实验
4.1.2 Plackett-Burman 实验结果
4.1.3 最陡爬坡试验选择最大响应区域
4.1.4 响应面分析及最佳发酵培养基确定
4.2 菌株 EBI-001 产酶条件优化实验
4.2.1 单因素实验
4.2.2 响应面分析及最佳培养条件确定
4.3 几丁质酶的酶学性质研究
4.3.1 几丁质酶最适 pH 的研究
4.3.2 几丁质酶最适温度的研究
4.3.3 金属离子对几丁质酶活性的影响
4.3.4 不同蛋白酶抑制剂对几丁质酶活性的影响
4.4 本章小结
第5 章 菌株EBI-001 几丁质酶家族生物信息学分析及几丁质代谢通路分析
5.1 菌株 EBI-001 几丁质酶家族预测
5.1.1 菌株 EBI-001 几丁质酶基因家族的鉴定与分类
5.1.2 几丁质酶家族理化性质分析
5.1.3 几丁质酶家族跨膜区域分析
5.1.4 几丁质酶家族信号肽预测与分析
5.1.5 几丁质酶家族保守结构域分析
5.1.6 几丁质酶基因家族二级结构预测分析
5.1.7 几丁质酶基因家族磷酸化位点分析
5.1.8 几丁质酶基因家族三级结构预测
5.2 菌株 EBI-001 体内几丁质代谢流程通路预测
5.2.1 菌株 EBI-001 编码参与几丁质代谢的酶基因预测
5.2.2 菌株 EBI-001 体内几丁质代谢流程通路预测
5.3 本章小结
结 论
参考文献
附 录
攻读硕士学位期间发表论文及其他成果
声明
致 谢
哈尔滨工业大学;
