帕金森病模型大鼠黑质GDNF、GFAP和整合素αM的表达及药物干预研究

摘要

目的：观察帕金森病（Parkinson's disease, PD）模型大鼠黑质内酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase, TH）、胶质细胞源性神经营养因子（glial cell line-derived neurotrophic factor, GDNF）、胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein, GFAP）和整合素αM（CD11b）的表达及咪多吡干预对其表达的影响，探讨神经营养因子和炎症反应在PD发生发展中的作用及咪多吡治疗PD的作用机制。　　方法：1.72只健康 SD大鼠随机分为：对照组、帕金森病模型组（模型组）和咪多吡治疗组（咪多吡组），每组又随机分为模型制备成功后4d和8d两个亚组，每个亚组各12只，其中6只用于免疫组化染色，另外6只用于 Western blotting检测。2.采用颈背部皮下注射鱼藤酮制备帕金森病模型大鼠。3.模型制备成功后每日灌胃给咪多吡（0.5mg/kg），分别连续给药4d和8d。4.用行为学评分测定大鼠的行为能力变化情况；免疫组化法和Western blotting法检测黑质 TH和GDNF、GFAP、CD11b表达水平。5.组织切片采用 OLYMPUS摄像显微镜（400×）摄像，并应用Motic Med6.0数码医学图像分析系统进行分析，Western blotting结果用Image J分析。6.采用SPSS13.0统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（(x)±s）表示，组间比较采用单因素方差分析，以P<0.05为差异有统计学意义。　　结果：1.对照组大鼠黑质可见多量 TH阳性细胞表达和一定量 GDNF阳性细胞表达，8d和4d比较无显著性差异（均P>0.05）。模型组TH阳性细胞表达和GDNF阳性细胞表达均明显减少，与对照组比较均有显著性差异（均 P<0.05），8d少于4d，无显著性差异（均 P>0.05）。咪多吡组 TH阳性细胞表达和GDNF阳性细胞表达均增多，与模型组比较均明显增多（均 P<0.05），8d多于4d，有显著性差异（均P<0.05）。2.对照组GFAP和CD11b阳性细胞均处于静息状态，GFAP阳性细胞胞体细长不规则，有细长的突起，CD11b阳性细胞胞体较小，呈分支状，突起较细长；模型组 GFAP和CD11b阳性细胞呈激活状态，GFAP阳性细胞胞体肥大，突起增多增粗，CD11b阳性细胞胞体增大，突起变粗变短，数量增多；咪多吡组与模型组比较，GFAP阳性细胞胞体及突起较细长，CD11b阳性细胞胞体较小，突起较细长，数量减少。对照组大鼠黑质可见少量的GFAP和CD11b阳性细胞表达，8d与4d比较无显著性差异（均P>0.05）；模型组GFAP和CD11b阳性细胞表达均明显增多，与对照组比较均有显著性差异（均 P<0.05），8d多于4d，无显著性差异（均 P>0.05）；咪多吡组 GFAP和CD11b阳性细胞表达均明显减少，与模型组比较均有显著性差异（均 P<0.05），8d少于4d，有显著性差异（均P<0.05）。　　结论：1.帕金森病模型大鼠黑质 TH与 GDNF表达明显减少，星形胶质细胞与小胶质细胞明显增生和活化；2.咪多吡能够增加 TH与 GDNF表达、抑制星形胶质细胞与小胶质细胞增生与活化。

目录

封面

声明

中文摘要

英文摘要

目录

引言

第1章 实验研究

1.1 材料与方法

1.1.1 主要试剂1.1.2 主要仪器1.1.3 实验动物及分组

1.1.4 动物模型制备及给药

1.1.5 免疫组化检测方法

1.1.6 免疫印迹检测方法

1.1.7 统计学分析

1.2 结果

1.2.1 各组大鼠黑质TH、GDNF、GFAP、CD11b免疫组化结果

1.2.2 各组大鼠黑质TH、GDNF、GFAP、CD11b免疫印迹结果

1.3 讨论

1.3.1 帕金森动物模型的制备

1.3.2 各组大鼠黑质TH、GDNF蛋白表达的变化

1.3.3 各组大鼠黑质GFAP、CD11b蛋白表达的变化

1.3.4 咪多吡对PD大鼠的神经保护作用

1.4 结论

参考文献

第2章 综 述关于胶质细胞与帕金森病的研究

2.1 胶质细胞的生物学功能

2.2 胶质细胞与帕金森病

2.2.1 PD中胶质细胞的保护作用

2.2.2 PD中胶质细胞的毒性作用

参考文献

致谢

导师简介

作者简介

学位论文数据集