从PI3K/Akt/P53信号传导通路探讨蛇葡萄素抗胃癌作用的机制研究

摘要

目的：从PI3K/Akt/P53信号传导通路探讨蛇葡萄素抗胃癌的作用机制。　　方法：（1）蛇葡萄素对人胃癌细胞细胞增殖的影响。取对数生长期细胞，设空白对照组、顺铂阳性对照组和蛇葡萄素组，以人胃癌 SGC-7901细胞为研究对象，采用MTT法评价蛇葡萄素体外对肿瘤细胞细胞增殖的影响及倒臵显微镜下观察各组细胞的形态学变化。（2）蛇葡萄素对 SGC-7901细胞 PI3K/Akt/P53信号传导通路的影响。取对数生长期细胞，设空白对照组和蛇葡萄素低、中、高剂量组（10.0μg/ml、20.0μg/ml、40.0μg/ml），药物作用48 h后，采用 Western blot技术检测蛇葡萄素对 SGC-7901细胞 PI3K/Akt/P53信号传导通路凋亡相关蛋白PI3K、Akt、P53、P21、Bcl-2、Bax表达的影响。　　结果：（1）蛇葡萄素对人胃癌细胞细胞增殖的影响。MTT法结果表明，蛇葡萄素19.7μg/ml、29.6μg/ml、44.4μg/ml、66.6μg/ml、100.0μg/ml对SGC-7901细胞的增殖有抑制作用，与空白组比较差异有显著性（P<0.05~0.01），且呈剂量依赖关系，其IC50为40.79μg/ml；倒臵显微镜观察可见，蛇葡萄素组与空白组比较，8.8μg/ml、13.2μg/ml浓度组细胞数目、形态改变不明显，19.7μg/ml、29.6μg/ml、44.4μg/ml、66.6μg/ml、100.0μg/ml浓度组细胞数目随着剂量的增加逐渐减少，形态改变明显，细胞体积变小、皱缩、破裂。（2）蛇葡萄素对SGC-7901细胞 PI3K/Akt/P53信号传导通路的影响。10.0μg/ml、20.0μg/ml、40.0μg/ml浓度的蛇葡萄素作用于SGC-7901细胞48h后，对PI3K、Akt蛋白的表达无明显影响，与空白对照组比较差异均没有显著性（P>0.05），其对PI3K的相对蛋白表达量分别为0.15±0.02、0.12±0.03、0.19±0.09，对 Akt的相对蛋白表达量分别为1.65±0.41、1.40±0.23、1.07±0.35。20.0μg/ml、40.0μg/ml浓度的蛇葡萄素作用于 SGC-7901细胞48h后，均可上调P53、P21蛋白的表达，与空白对照组比较差异有显著性（P<0.05），其对P53的相对蛋白表达量分别为2.97±0.34、3.13±0.64，对P21的相对蛋白表达量分别为0.36±0.06、0.34±0.05；而40.0μg/ml可上调Bax、下调Bcl-2蛋白的表达，与空白对照组比较差异有显著性（P<0.05~0.01），其对 Bax的相对蛋白表达量为0.21±0.04，对Bcl-2的相对蛋白表达量为0.13±0.02。　　结论：蛇葡萄素对人胃癌 SGC-7901细胞的增殖有明显抑制作用，其抗肿瘤机制与上调PI3K/Akt/P53信号传导通路中的P53、P21、Bax和下调Bcl-2蛋白的表达有关，与PI3K、Akt蛋白的表达无关。

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引言

正文

第 一 部 分蛇葡萄素对人胃癌细胞细胞增殖的影响

1 实验材料

2 实验方法

3 结果

4 讨论

5结论

第二部分蛇葡萄素对人胃癌细胞PI3K/Akt/P53信号传导通路的影响

1 实验材料

2 实验方法

3 结果

4 讨论

5结论

结 语 与 展 望

参考文献

综述

致谢

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