硫酸铝钾对体外培养的小鼠胚胎细胞增殖和分化的影响

摘要

目的:观察硫酸铝钾对体外培养的胚胎中脑神经细胞和肢芽细胞增殖、分化的影响，并探讨其体外发育毒性特点，为揭示其致畸性及其作用机理提供实验依据。 方法:根据Flint等提出的胚胎细胞微团培养方法，在本实验室首次建立小鼠胚胎中脑神经细胞和肢芽细胞微团培养模型，并用阳性对照物维生素A验证其可靠性。从12天龄小鼠胚胎中分离出中脑神经细胞和肢芽细胞，体外暴露于不同剂量的阳性对照物维生素A(终浓度分别为0.125、1.25、12.5、25.0和50.0μg/ml培养液)和硫酸铝钾(A13+终浓度分别为0.1、1、2、4、8、10、20、40、80和100μmol/L培养液)，连续培养5天。5天后，根据噻唑蓝(MTT)比色试验和细胞集落形成抑制水平来反映维生素A、硫酸铝钾对体外培养的中脑神经细胞和肢芽细胞增殖、分化的影响。 结果:1.维生素A对体外培养的胚胎中脑神经细胞的增殖和分化均有抑制作用，并有明显的剂量-效应关系(r=-0.915、r=-0.921，P＜0.05)，其半数增殖抑制浓度(ICv50)和半数分化抑制浓度(ICd50)分别为13.1μg/ml、0.64μg/ml，与报道基本一致，证明所建方法可靠。 2.维生素A对体外培养的胚胎肢芽细胞的增殖和分化均有抑制作用，并有明显的剂量-效应关系(r=-0.932、r=-0.947，P＜0.05)，其半数增殖抑制浓度(ICv50)和半数分化抑制浓度(ICd50)分别为5.1μg/ml、0.04μg/ml，与报道基本一致，证明所建方法可靠。 3.不同剂量的硫酸铝钾对体外培养的胚胎中脑细胞的增殖和分化均有抑制作用，并有明显的剂量-效应关系(r=-0.975、r=-0.936，P＜0.05)，其半数增殖抑制浓度(ICv50)和半数分化抑制浓度(ICd50)分别为43.75μmol/L、3.70μmol/L，V/D值为11.82。 4.不同剂量的硫酸铝钾对体外培养的胚胎肢芽细胞的增殖和分化也均有抑制作用，并有明显的剂量-效应关系(r=-0.972、r=-0.928，P＜0.05)，其半数增殖抑制浓度(ICv50)和半数分化抑制浓度(ICd50)分别为45.03μmol/L、3.38μmol/L，V/D值为13.32。 结论:根据Flint、Renault等人提出的体外致畸实验判断标准，硫酸铝钾是小鼠胚胎中脑细胞和肢芽细胞分化的特异性抑制剂，判断为体外细胞致畸试验阳性，具有潜在的致畸性。

目录

文摘

英文文摘

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前言

第一部分小鼠胚胎中脑神经细胞和肢芽细胞微团培养方法的建立

第二部分硫酸铝钾对胎鼠中脑神经细胞增殖和分化的影响

第三部分硫酸铝钾对胎鼠肢芽细胞增殖和分化的影响

结论

参考文献

致谢

攻读学位期间发表的学术论文