过表达PGC-1α对MPP+诱导SH-SY5Y细胞线粒体未折叠蛋白反应(mtUPR)的影响

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英文缩略语表

引言

材料与方法

1.1 细胞株

1.2 腺病毒

1.3 主要仪器

1.4 主要试剂

2 实验方法

2.1 SH-SY5Y细胞培养、传代、冻存

2.2 MPP+干预SH-SY5Y细胞（六孔板为例）

2.3 实验分组

2.4 Western blot检测线粒体内蛋白YME1L1、HSPA9、CLPP、HSPE1表达情况

2.5 Western blot检测胞浆蛋白PGC-1α、LRPPRC的表达情况

2.6 BCA法测定蛋白浓度

2.7 Western blot操作步骤

2.8 Real-Time PCR检测各实验组mRNA的变化

2.9 荧光共聚焦显微镜观察细胞荧光

3 统计学处理

结 果

2.Real-Time PCR方法检测MPP+干预后SH-SY5Y细胞不同时间点YME1L1、HSPA9、CLPP、HSPE1 mRNA表达变化

3.荧光显微镜观察腺病毒感染SH-SY5Y细胞的最佳MOI值

5.免疫印迹法检测PGC-1α过表达对YME1L1、HSPA9、CLPP及HSPE1蛋白表达水平的影响

6.Real-Time PCR方法检测PGC-1α过表达对YME1L1、HSPA9、CLPP及HSPE1 mRNA表达水平的影响

8.Real-Time PCR方法检测SH-SY5Y细胞过表达PGC-1α对LRPPRC转录水平影响

9.荧光共聚焦显微镜观察LRPPRC在不同实验组核内外分布情况

讨论

结 论

参考文献

综述:线粒体未折叠蛋白反应及其与神经系统疾病关系研究进展

致谢