同位素稀释质谱法测定奶粉基体中药物残留的基质效应研究

摘要

本文首先采用同位素稀释质谱法建立奶粉中氯霉素的高准确度测量方法;采用摇瓶法首次测定了D5-氯霉素、13C3-三聚氰胺，15N3-三聚氰胺，13C3-15N3-三聚氰胺四种同位素稀释剂的油水分配系数;采用目标物响应曲线的斜率(K)值，建立了同位素稀释质谱法基质效应(ME)的评价方法和计算公式，首次提出同位素稀释质谱法基质效应校正因子θ，用以评估基质效应对同位素稀释质谱法测量结果的影响，并建立其计算公式。
　　 1，采用负离子多级反应离子监测模式。实验详细优化了仪器条件和样品前处理方法。方法检出限为0.0040μg/kg，定量限为0.010μg/kg。添加水平为0.3μg/kg，0.9μg/kg，2.0μg/kg时的回收率分别是100.23％，100.96％％，96.74％％，标准偏差分别是3.31％、3.34％、1.48％。
　　 2，首次测试了D5-氯霉素，13C3-三聚氰胺、13C3-15N3-三聚氰胺、15N3-三聚氰胺四种同位素稀释剂的油水分配系数。氯霉素与D5-氯霉素在浓度为5.0mg/kg时，Log(Kow)分别为1.112、1.070。三聚氰胺、13C3-三聚氰胺、13C3-15N3-三聚氰胺、15N3-三聚氰胺在浓度为5.0mg/kg时，测得油水分配系数分别为-1.339、-1.375、-1.335、-1.159。
　　 3，流动相中有机相比例的增大，可以减小目标物与其同位素标记物的基质效应差异。流动相对化合物的响应影响明显大于样品溶剂的影响。LLE、HLB、MCX、MIP之间的基质效应和对测量结果的影响差异较大。氯霉素与D5氯霉素在API5000的离子源中离子化的过程相对稳定。而Waters XEVO TQS和Agilent6490的离子源的设计，受到样品前处理方法的影响较大。不同来源的三种奶粉基质对目标物基质效应不同。
　　 4，实验发现喷雾电压和离子源温度对四种化合物的质谱响应规律。内标的定量碎片离子的响应明显低于三聚氰胺定量碎片离子的响应。当采用2％的二乙胺乙腈和5％的氨化甲醇作为洗脱溶剂得到的基质，适合采用斜率评估基质效应;液液萃取和采用甲醇为洗脱溶剂时得到的基质不适合采用斜率评估基质效应。当被测物的浓度小于2μg/kg时，存在严重的基质效应。当浓度大于5μg/kg时，基质效应明显降低，目标物与其同位素稀释剂之间的基质效应差异缩小。

目录

声明

致谢

摘要

第一章 绪论

1 引言

2 基质效应研究的进展

2．1 基质效应的定义

2．2 基质效应的评估方法

2．3 减小或消除基质效应的方法

2．4 同位素稀释质谱法及对测量结果的影响因素

3 选题依据

4 研究思路

第二章 同位素稀释质谱法准确测定奶粉中的氯霉素

1 引言

2 实验部分

2．1 仪器与试剂

2．2 实验方法

3 结果与讨论

3．1 仪器条件的优化

3．2 样品前处理条件的优化

3．3 精密度

3．4 线性范围、检出限、定量限

3．5 方法回收率

4 小结

第三章 HPLC法测定氯霉素和三聚氰胺的油水分配系数

1 引言

2 实验部分

2．1 仪器与试剂

2．2 工作溶液

2．3 测试条件

2．4 测试原理

2．5 实验方法

3 结果与讨论

3．1 标准曲线

3．2 氯霉素和D5氯霉素的油水分配系数的测定

3．3 三聚氰胺及其三种内标的油水分配系数的测定

4 小结

第四章 同位素稀释质谱法测定奶粉中氯霉素的基质效应研究

1 引言

2 实验部分

2．1 仪器与试剂

2．2 前处理技术

2．3 液相色谱和质谱条件

2．4 实验方法

3 结果与讨论

3．1 基体效应的评价与校正

3．2 前处理以及仪器对基质效应的影响

3．3 不同样品基质来源的基质效应评价

3．4 流动相和稀释溶剂对基质效应的影响

4 小结

第五章 同位素稀释质谱法测定奶粉中三聚氰胺的基质效应研究

1 引言

2 实验部分

2．1 仪器与试剂

2．2 测试条件

2．3 前处理方法

3 结果与讨论

3．1 三聚氯胺与三种内标在不同浓度下峰面积比值

3．2 质谱仪器关键参数对四种化合物的质谱响应影响

3．3 三聚氰胺与三种同位素稀释剂的离子抑制效应

3．4 基质效应

4 小结

第六章 结论与展望

符号索引

硕士期间发表论文

参考文献