三元杂交猪SLA Ⅰ等位基因多态性分析及晶体结构研究

目录

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摘要

第一章绪论

1．1MHC分子及其分类

1．2MHC分子的多态性

1．3MHCⅠ类分子的限制性

1．4MHCⅠ类分子的功能及多肽抗原加工递呈过程

1．5NHCl类分子的结构

2 SLAⅠ类分子

2．2猪SLAⅠ基因组结构及功能

2．3猪SLA多态性

2．4猪SLAⅠ的结构

3 T细胞表位检测的研究方法

4猪常见病毒性疫病表位多肽的研究进展

4．1流行性腹泻(PEDV)

4．2猪圆环病毒2型(PCV2)

4．3猪瘟病毒(CSFV)

5本课题研究的意义和内容

第二章猪SLAⅠ类分子的克隆及高频率等位基因的筛选

1材料

1．1样品

1．2主要试剂

1．3主要仪器设备

1．4常用溶液的配制

2方法

2．1SLAⅠ基因的克隆

3结果

3．2SLAⅠ等位基因表达频率

3．3新发现SLAⅠ类分子等位基因

3．4新发现SLAⅠ类分子等位基因进化树分析

4小结

第三章猪SLA I类分子等位基因多态性分析及超级型的建立

1 材料

1．1序列

1．2菌株及质粒

1．3主要试剂

1．4主要仪器设备

1．5常用溶液的配制

2方法

2．4SLAⅠ类分子蛋白的表达与复合体的制备

3结果

3．1SLAⅠ类分子的多态性分析

3．2SLAⅠ类分子超级型的建立

3．3各超级型中等位基因α1和α2区域的高变位点分析

3．4 SLAⅠ类等位基因MH295054模拟晶体结构分析及与多肽复合物的稳定性研究

4小结

第四章猪SLAⅠ类分子pSLA-1*a01和pSLA-3*c01复合物晶体结构研究

1材料

1．1主要试剂

1．2主要仪器设备

1．3常用溶液的配制

2方法

2．1SLAⅠ类分子蛋白的表达与复合体的制备

2．2蛋白复合物的结晶

3结果

3．1蛋白的诱导表达

3．2体外结合多肽的筛选

3．3MHCⅠ／β2m／多肽结晶条件的筛选

3．4SLAⅠ晶体结构数据解析

3．5SLAⅠ类分子和多肽复合物的晶体结构分析

4小结

第五章口蹄疫病毒细胞毒性淋巴细胞表位的筛选及免疫效果研究

1材料

1．1实验动物

1．2口蹄疫灭活抗原

1．3佐剂

1．4CTL表位多肽

1．5试剂盒

1．6其它试剂

1．7仪器设备

2方法

2．1内源化佐剂筛选

2．2CTL表位肽筛选

2．3备选多肽对灭活疫苗的增强效果实验

2．4 Elispot实验检测外周血淋巴细胞中细胞因子表达量

2．5荧光定量PCR(Realtime PCR)检测动物外周血淋巴细胞细胞因子表达量

2．6口蹄疫抗体检测

3结果

3．1内源化佐剂筛选筛选结果

3．2CTL表位肽筛选结果

3．3备选多肽对灭活疫苗的增强效果实验

4小结

第六章结论与建议

6．1主要结论

6．2创新点

6．3建议与展望

参考文献

附录

致谢

研究成果及发表的学术论文

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