S100P对结直肠癌细胞系的影响及其在结直肠癌组织中的表达和意义

摘要

目的：
　　 观察S100P对人结直肠癌细胞系SW480生物学行为（生长增殖、迁移、侵袭及对5-FU的敏感性）的影响。检测S100P在结直肠癌组织中的表达情况，探讨其临床病理意义。
　　 方法：
　　 采用Real-time PCR方法检测S100P mRNA在正常人结肠细胞系NCM460及结直肠癌细胞系SW480，SW620，HCT116，LS180，HT29及DLD-1中的表达情况。构建S100P慢病毒转染载体，转染至不表达S100P的人结直肠癌SW480细胞，用RT-PCR及Western Blotting方法检测其是否转染成功。用MTT法检测细胞的生长增殖情况，分析S100P对SW480细胞的生长增殖及其对5-FU敏感性的影响;采用Transwell细胞迁移和侵袭实验，分析S100P对细胞迁移和侵袭能力的影响。
　　 收集86例我院2003-2007年结直肠癌石蜡包埋组织及其癌旁的正常肠粘膜组织，制作成组织芯片，免疫组织化学法检测S100P在其中的表达情况。分析S100P在结直肠癌组织和正常肠粘膜组织之间的差异;研究S100P的表达与患者各项临床病理指标（性别、TNM分期、分化程度、肿块大小、肿块浸润深度、肠周淋巴结转移情况及肿瘤有无复发）之间的关系;分析S100P的表达与患者预后之间的关系。
　　 结果：
　　 (1)正常人结肠细胞系NCM460及结直肠癌SW620，LS180，HT29及DLD-1细胞系中均检测到S100P mRNA的表达;而在结直肠癌SW480和HCT116细胞系中未出现S100P mRNA的表达。
　　 (2)经S100P慢病毒载体转染成功后的SW480细胞，S100P mRNA和蛋白表达水平明显增加。
　　 (3)野生型SW480细胞、未整合S100P基因的慢病毒载体转染的SW480-EGFP细胞和稳定表达S100P的SW480-S100P细胞的生长增殖情况没有表现出明显的差别。
　　 (4)与SW480和SW480-EGFP细胞相比，SW480 S100P细胞对5-FU的敏感性下降。
　　 (5)与SW480和SW480-EGFP细胞相比，SW480-S100P细胞的迁移和侵袭能力明显增强，差异有统计学意义（P＜0.01）。
　　 (6)86例结直肠癌组织中，S100P高表达有65例，高表达率75.58％(65/86);而在其对应的86例癌旁正常肠粘膜组织中，S100P高表达15例，高表达率仅为17.44％(15/86)。S100P在结直肠癌组织中的高表达率明显高于癌旁正常肠粘膜组织，高出58.14％，两组之间进行比较，差异有统计学意义（P＜0.01）。
　　 (7) S100P表达水平在不同TNM分期中出现差异，Ⅰ-Ⅱ期中，S100P高表达率66.67％(32/48)，Ⅲ期为86.84％(33/38)。在未出现肠周淋巴结转移和有肠周淋巴结转移的患者中，S100P高表达率分别为66.67％(30/45)、85.37％(35/41)。统计学分析结果显示，S100P的表达与肿瘤TNM分期和肠周淋巴结转移情况有关(P值分别为0.031和0.044);而与患者性别、分化程度、肿块大小、肿块浸润深度及肿瘤有无复发之间的差异未出现统计学意义。
　　 (8) Kaplan-Meier单因素生存分析结果显示，S100P表达与病人预后之间未出现统计学意义（P=0.171），但生存曲线显示S100P低表达者相对高表达者生存时间较长。
　　 结论：
　　 (1) S100P不影响SW480细胞的生长增殖。
　　 (2) S100P的高表达降低了结直肠癌细胞SW480对5-FU的敏感性。
　　 (3) S100P能增加SW480细胞迁移和侵袭的能力。
　　 (4) S100P在结直肠癌组织中表达升高，而在正常肠粘膜组织中表达较低，可能参与了结直肠癌的发生。
　　 (5) S100P的表达与肿瘤TNM分期和肠周淋巴结转移情况呈正相关，说明其可能促进结直肠癌的转移。
　　 (6) S100P的表达与患者的生存预后呈负相关趋势，其表达升高提示患者可能有不良的预后。

目录

摘要

前言

第一部分 S100P对结直肠癌细胞系的影响

1．实验材料

2．实验方法

3．统计学处理

4．试验结果

第二部分 S100P在结直肠癌组织中的表达和意义

1．实验材料

2．实验方法

3．统计学处理

4．实验结果

分析与讨论

小结

参考文献

附录

致谢

综述 S100P与结直肠癌的研究进展

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