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CP--25调控成纤维样滑膜细胞芳香烃受体表达发挥治疗佐剂性关节炎大鼠的作用研究

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目录

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英文缩略词表(Abbreviation)

1 前言

2 实验材料

2.1 实验动物

2.2 细胞株

2.3药物与试剂

2.4 主要实验仪器

3 方法

3.1 免疫组化法检测Ahr在RA及OA病人关节滑膜中的表达

3.2 大鼠AA模型的建立

3.3 给药方法

3.4 评分指标

3.5 大鼠脾脏和胸腺指数的计算

3.6 大鼠淋巴细胞增殖的检测

3.7 HE法检测膝关节、脾脏组织病理学变化

3.8 免疫组化法检测大鼠膝关节Ahr的表达

3.9 大鼠FLS的分离和培养

3.10 Western blot 检测Ahr在FLS中的表达

3.11 激光共聚焦检测Ahr在大鼠FLS中的表达以及Ahr和GRK2的共定位

3.12 FLS增殖能力的检测

3.13 酶联免疫吸附法检测大鼠血清和FLS培养上清中IL-1β的水平

3.14 Western blot 检测不同浓度CP-25对MH7A细胞中Ahr表达的影响

3.15 激光共聚焦检测不同浓度CP-25对Kyn刺激的MH7A细胞中Ahr表达的影响

3.16 CP-25对Kyn刺激的MH7A细胞功能的检测

3.17 Q-PCR检测CP-25对Kyn刺激的MH7A细胞表达CYP1A1的影响

3.18免疫共沉淀法检测MH7A细胞中GRK2与Ahr相互作用的情况

3.19 Ahr siRNA转染方法及转染后MH7A功能的检测

3.20 统计学分析

4 结果

4.1 RA及OA病人关节滑膜中Ahr的表达

4.2 CP-25对大鼠临床表现的影响

4.3 CP-25对大鼠膝关节滑膜、脾脏组织病理学变化的影响

4.4 CP-25对大鼠脾脏和胸腺指数的影响

4.5 CP-25对大鼠淋巴细胞增殖的影响

4.6 CP-25对AA大鼠血清中IL-1β水平的影响

4.7 CP-25对AA大鼠FLS增殖及FLS培养上清中IL-1β水平的影响

4.8 CP-25对AA大鼠膝关节组织中Ahr表达的影响

4.9 CP-25对AA大鼠FLS中Ahr表达的影响(Western blot法)

4.10 CP-25对AA大鼠FLS中Ahr和GRK2共定位的影响(激光共聚焦法)

4.11 CP-25对Kyn刺激的MH7A细胞中Ahr表达的影响

4.12 CP-25对MH7A细胞中Ahr与GRK2共定位的影响(激光共聚焦法)

4.13 CP-25对MH7A细胞中Ahr与GRK2相互作用的影响(免疫共沉淀法)

4.14 CP-25对于Kyn刺激的MH7A功能的影响

4.15 CP-25对Kyn刺激的MH7A中CYP1A1表达的影响

4.16 Ahr siRNA 转染的MH7A功能变化

5讨论

5.1 Ahr异常表达参与了RA患者的病理机制

5.2 CP-25通过调控Ahr的表达发挥治疗AA大鼠的作用

5.3 CP-25通过调控FLS中Ahr和GRK2相互作用抑制滑膜炎症和关节损伤

6 结论

参考文献

附录

致谢

综述:芳香烃受体在自身免疫疾病中的研究进展

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著录项

  • 作者

    张冰洁;

  • 作者单位

    安徽医科大学;

  • 授予单位 安徽医科大学;
  • 学科 药学
  • 授予学位 硕士
  • 导师姓名 常艳,魏伟;
  • 年度 2020
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 R59R-3;
  • 关键词

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