声明
英文缩略词表(Abbreviation)
1 前言
2 实验材料
2.1 实验动物
2.2 细胞株
2.3药物与试剂
2.4 主要实验仪器
3 方法
3.1 免疫组化法检测Ahr在RA及OA病人关节滑膜中的表达
3.2 大鼠AA模型的建立
3.3 给药方法
3.4 评分指标
3.5 大鼠脾脏和胸腺指数的计算
3.6 大鼠淋巴细胞增殖的检测
3.7 HE法检测膝关节、脾脏组织病理学变化
3.8 免疫组化法检测大鼠膝关节Ahr的表达
3.9 大鼠FLS的分离和培养
3.10 Western blot 检测Ahr在FLS中的表达
3.11 激光共聚焦检测Ahr在大鼠FLS中的表达以及Ahr和GRK2的共定位
3.12 FLS增殖能力的检测
3.13 酶联免疫吸附法检测大鼠血清和FLS培养上清中IL-1β的水平
3.14 Western blot 检测不同浓度CP-25对MH7A细胞中Ahr表达的影响
3.15 激光共聚焦检测不同浓度CP-25对Kyn刺激的MH7A细胞中Ahr表达的影响
3.16 CP-25对Kyn刺激的MH7A细胞功能的检测
3.17 Q-PCR检测CP-25对Kyn刺激的MH7A细胞表达CYP1A1的影响
3.18免疫共沉淀法检测MH7A细胞中GRK2与Ahr相互作用的情况
3.19 Ahr siRNA转染方法及转染后MH7A功能的检测
3.20 统计学分析
4 结果
4.1 RA及OA病人关节滑膜中Ahr的表达
4.2 CP-25对大鼠临床表现的影响
4.3 CP-25对大鼠膝关节滑膜、脾脏组织病理学变化的影响
4.4 CP-25对大鼠脾脏和胸腺指数的影响
4.5 CP-25对大鼠淋巴细胞增殖的影响
4.6 CP-25对AA大鼠血清中IL-1β水平的影响
4.7 CP-25对AA大鼠FLS增殖及FLS培养上清中IL-1β水平的影响
4.8 CP-25对AA大鼠膝关节组织中Ahr表达的影响
4.9 CP-25对AA大鼠FLS中Ahr表达的影响(Western blot法)
4.10 CP-25对AA大鼠FLS中Ahr和GRK2共定位的影响(激光共聚焦法)
4.11 CP-25对Kyn刺激的MH7A细胞中Ahr表达的影响
4.12 CP-25对MH7A细胞中Ahr与GRK2共定位的影响(激光共聚焦法)
4.13 CP-25对MH7A细胞中Ahr与GRK2相互作用的影响(免疫共沉淀法)
4.14 CP-25对于Kyn刺激的MH7A功能的影响
4.15 CP-25对Kyn刺激的MH7A中CYP1A1表达的影响
4.16 Ahr siRNA 转染的MH7A功能变化
5讨论
5.1 Ahr异常表达参与了RA患者的病理机制
5.2 CP-25通过调控Ahr的表达发挥治疗AA大鼠的作用
5.3 CP-25通过调控FLS中Ahr和GRK2相互作用抑制滑膜炎症和关节损伤
6 结论
参考文献
附录
致谢
综述:芳香烃受体在自身免疫疾病中的研究进展
安徽医科大学;