酒精性脂肪肝大鼠肝脏中CYP1A2的变化及其对乙醇诱导的脂质代谢的调节作用和部分机制的研究

目录

声明

中英文缩略词对照

1. 前言

1.1 酒精性脂肪肝与细胞色素P450酶

1.2 酒精对脂质代谢的影响及其调控机制

2. 实验材料

2.1 实验动物

2.2 细胞系

2.3 药物与试剂

2.4 仪器与设备

2.5 溶液和试剂的配制

2.5 图像分析软件及数据处理系统

2.6 引物基因序列

3. 实验方法

3.1 酒精性脂肪肝大鼠模型的建立

3.2 人肝L02细胞的培养与体外酒精性肝损伤模型的建立

3.3 Real Time-PCR实验

3.4 Western-blot 实验

3.5 大鼠肝微粒体外温孵实验

3.6 大鼠肝微粒体中探针代谢物浓度测定的LC-MS/MS方法

3.7 siRNA干扰实验

3.8 转染试验

3.9 细胞内活性氧（ROS）生成检测

3.10 细胞脂质过氧化功能检测

3.11 统计学处理

4. 结果

4.1 AFLD模型大鼠肝脏HE染色结果

4.2 生化指标检测结果

4.3 各组大鼠肝脏中CYP450亚型酶的mRNA表达水平

4.4 各组大鼠肝脏中CYP450亚型酶的蛋白表达水平

4.5 各组大鼠肝脏中ALDH2的蛋白表达

4.6 各组大鼠肝脏中P-gp的蛋白表达

4.7 肝微粒体中特异性代谢产物测定的方法学结果

4.8 大鼠肝微粒体中CYP450亚型酶活性测定

4.9 酒精性肝损伤体外模型的建立

4.10 酒精性损伤肝细胞中主要炎症因子和代谢相关酶的表达

4.11 人正常肝细胞株L02中沉默CYP1A2

4.12 酒精刺激转染细胞后CYP1A2的表达变化

4.14 酒精刺激抑制剂处理的细胞后CYP1A2的表达变化

4.15 酒精刺激转染后细胞中生化指标的变化

4.16 酒精刺激siRNA-CYP1A2转染细胞后SREBP-1c, PTEN，AKT和p-AKT的蛋白表达变化

4.17 酒精刺激马来酸氟伏沙明处理细胞后SREBP-1c, PTEN，AKT和p-AKT的蛋白表达变化

4.18 PTEN/AKT通路对SREBP-1c的调控作用

4.19 CYP1A2对酒精性肝损伤所致的氧化应激的影响

4.20 CYP1A2对酒精性肝损伤所致的脂质过氧化的影响

5. 讨论

5.1 酒精肝大鼠肝脏中CYP450酶的变化及其影响

5.2 CYP1A2在乙醇诱导的肝脏脂质代谢异常中的功能及潜在机制

6. 结论

参考文献

附录

致谢

综述:酒精对脂质代谢调控的机制