声明
缩略词表
第一部分 文献综述关于EMT调控网络概述及应用
前言
1 EMT概念
2 参与EMT调控的信号通路
2.1 TGF-β信号通路
2.2 Wnt信号通路
2.3 Notch信号通路
2.4 microRNA和lncRNA
2.5 有丝分裂生长因子
3 EMT相关应用
3.1 EMT和癌症
3.2 EMT和干细胞
3.3 EMT和治疗
3.4 EMT和MET
4 总结
第二部分 实验部分建立Td-tomato标记KRT18基因的牛胎儿成纤维细胞系及用于iPS诱导的初步研究
1 前言
1.1 建立Td-tomato标记KRT18基因的牛胎儿成纤维细胞系
1.2 不同培养体系下打靶细胞系诱导iPSC初步研究
2 试剂与设备
2.1 实验材料与试剂
2.2 实验设备及仪器
3 实验方法
3.1 胎牛成纤维基因组的提取
3.2 目的基因同源臂的获得
3.3 同源臂连接T载体及鉴定
3.4 pTKlrkt载体构建
3.5牛子宫内膜上皮细胞（BEnEpC）转染pTKlrkt质粒
3.6 胎牛成纤维细胞（BFF）电转条件的优化和转染
3.7 打靶细胞株的筛选与鉴定
3.8 慢病毒转染打靶细胞系
3.9 不同培养体系与转染方案样品提取RNA
3.10 反转cDNA的获取
3.11 相关基因RT-PCR的检测与分析
4 结果
4.1 pTKlrkt打靶载体构建
4.2 牛子宫上皮细胞转染打靶载体pTKlrkt后的td-Tomato蛋白表达
4.3 转染条件的比较分析结果
4.4 打靶细胞系的建立
4.5 人源因子慢病毒转染BFF-KRT18-Tomato细胞系的结果
4.6 不同培养体系对转染后细胞生长状态的影响
4.7 不同转染体系下D18多能性因子表达的分析
5 讨论
5.1 Td-tomato标记KRT18基因打靶细胞系的建立
5.2 不同培养体系下打靶细胞系诱导iPSC初步探究
6 结论
参考文献
致谢
攻读学位期间论文发表情况
