优化肝移植供肝灌流液的基础研究

摘要

目的：
　　肝移植对于终末期肝病是一个常规的有效治疗手段，虽然有较好的疗效，但是仍然存在很大的挑战。其中供肝短缺就是一个主要的问题。所以扩大供肝范围，如何合理利用边缘供肝，提高供肝质量成为一个紧急迫切的事情。众多实验证明供肝通过机器灌注后可以有效改善供肝质量，提高移植术后生存率。所以现在寻找一种可以增加供肝保存时间以及减少供肝氧自由基、炎症介质的灌流液成为当务之急。本实验通过对临床常用灌流液HTK液中增加绿茶多酚以及溶解氧对大鼠的肝脏进行机器灌注，来研究新型灌流液对于供肝的保护作用。
　　方法：
　　绿茶多酚+HTK液改良灌流液:将SD大鼠随机分配成一下两组:(1) HTK对照试验组(n=6);(2)HTK+绿茶多酚(GTP)(60μg/ml)(n=6)。O2+HTK液改良灌流液:将SD大鼠随机分配成一下两组:(1)HTK对照试验组(n=6）;(2)HTK灌流液中持续充气（95％氧气和5％二氧化碳混合气体）(n=6)。对大鼠肝脏进行门静脉以及胆管插管，之后从大鼠中取下，通过门静脉导管与机器灌流系统连接，以5rpm的流速进行灌注。在7个时间点进行灌流液的收集(0h，1h，3h，6h，8h，10h，12h)来检测肝功能(谷丙转氨酶(ALT)，谷草转氨酶(AST)，乳酸脱氢酶(LDH))以及电解质(Na，K，Cl)。同时我们保留肝组织的一部分为了之后的组织学研究（HE染色）。收集新鲜的肝组织样本保存于-80℃为了之后的研究(丙二醛(MDA)，髓过氧化物酶(MPO))。
　　结果：
　　通过HTK对照组以及GTP实验组的比较，ALT(8h，10h:p＜0.05;12h:p＜0.01)，AST(10h:p＜0.05;12h:p＜0.01),LDH(1h,3h,6h,8h,10h,12h:p＜0.05)MPO(p＜0.05),MDA(p＜0.01)在对照组中普遍高于实验组。病理学方面HTK对照组炎细胞浸润明显，肝窦及中央静脉充血明显。两组干湿重比没有明显差异。HTK对照组与HTK+O2实验组比较:ALT(6h，8h，10h:p＜0.05)，AST(8h，10h，12h:p＜0.05)，LDH(6h，8h，10h:p＜0.05)MPO(p＜0.05)，MDA(p＜0.05)在对照组中普遍高于实验组。病理学方面，HTK对照组炎细胞浸润明显，肝窦及中央静脉充血明显。两组干湿重比没有明显差异。
　　结论：
　　在低温机器灌注下绿茶多酚以及溶解氧对于大鼠肝移植中的供肝有保护作用。

目录

声明

致谢

摘要

中英文缩略词

前言

第一章：绿茶多酚+HTK液改良灌流液

材料与方法

1．材料

2．手术方法及取材

3．实验指标测定

4．统计学处理

结果

1 肝功能及电解质

2 组织病理

3 MPO

4 MDA

5 干湿重比(D／W)

讨论

第二章：O2+HTK液改良灌流液

材料与方法

1．材料

2．手术方法及取材

3．实验指标测定

4．统计学处理

结果

1 肝功能及电解质

2 组织病理

3 MPO

4 MDA

5 干湿重比(D／W)

讨论

参考文献

肝移植供肝保存液的研究进展

综述 肝移植供肝保存液的研究进展

作者简历及在学期间所取得的科研成果