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基于P38MAPK/PGC-1通路研究保元解毒汤调控线粒体功能改善癌因性肌肉萎缩机制

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引言

第一部分 保元解毒汤对癌性恶病质动物肌肉萎缩的影响

1 实验材料

1.1实验动物

1.2实验药物

1.3 实验仪器

1.4 实验试剂

2 实验方法

2.1 试剂的配制

2.2保元解毒汤水煎液的制备及质控分析

2.3造模及分组干预

2.4 动物一般情况及体重变化

2.5 腓肠肌重量及HE染色

2.7 肌肉萎缩相关蛋白检测

2.8 统计学分析

3.1 不同批次保元解毒汤质量评价

3.2 保元解毒汤对恶病质模型小鼠体重的影响

3.3保元解毒汤对恶病质模型小鼠腓肠肌的影响

3.4保元解毒汤对恶病质模型小鼠P38MAPK、PGC-1α mRNA的影响

3.5保元解毒汤对恶病质模型小鼠P38MAPK/PGC-1α通路蛋白的影响

3.6保元解毒汤对恶病质模型小鼠Atrogin-1、MuRF-1mRNA的影响

3.7保元解毒汤对恶病质模型小鼠Atrogin-1、MuRF-1的影响

4 小结

第二部分 癌因性肌管萎缩模型的建立与评价

1实验材料

1.1 实验细胞

1.2实验仪器

1.3 实验试剂

2实验方法

2.1试剂的配制

2.2 细胞培养

2.3 条件培养基制备

2.4癌因性肌管萎缩模型的构建及分组干预

2.5普通倒置显微镜动态观察肌管形态变化

2.7 肌肉萎缩相关蛋白检测

2.8统计学分析

3.1不同浓度LCM培养不同时间对肌管形成的影响

3.2上清液中TNF-α和IL-6水平测定

3.3 不同浓度LCM对肌管萎缩相关因子mRNA和蛋白表达的影响

4 小结

第三部分 保元解毒汤通过P38MAPK/PGC-1通路调控线粒体功能干预癌因性肌管萎缩模型机制研究

1.1实验细胞

1.2 实验仪器

1.3 实验试剂

2 实验方法

2.1 试剂的配制

2.2 细胞培养

2.3保元解毒汤干预时间和浓度测定

2.5 肌管分化及萎缩相关蛋白mRNA及蛋白检测

2.6 细胞因子含量检测

2.7 P38MAPK/PGC-1通路相关因子检测

2.8 线粒体数量检测

2.9 线粒体mtDNA拷贝数

2.10线粒体TFAM、NRF-1、Cytc及COXIV mRNA和蛋白检测

2.11生物化学法检测ATP酶活性

2.12 线粒体ATP合成酶β亚基检测

2.13 统计学分析

3 结果

3.1 不同浓度保元解毒汤对癌因性肌管萎缩的影响

3.2 不同浓度保元解毒汤对C2C12细胞上清液TNF-α和IL-6含量的影响

3.3保元解毒汤对MYH3、Myf6、MyoD、Atrogin-1和MuRF-1的影响

3.4 保元解毒汤对P38MAPK/PGC-1通路相关因子的影响

3.5 保元解毒汤对线粒体数量的影响

3.6 保元解毒汤对线粒体mtDNA拷贝数、ATP合成酶β亚基的影响

3.7 保元解毒汤对线粒体NRF-1、TFAM、COXIV和CytC的影响

3.8保元解毒汤对线粒体ATP酶活性的影响

4 小结

讨论

1 癌性恶病质肌肉萎缩研究概述

1.1 现代医学对癌性恶病质肌肉萎缩发病机制的研究

1.2 传统中医对癌性恶病质肌肉萎缩病因病机的研究

1.3 癌性恶病质肌肉萎缩的治疗现状

2 保元解毒汤干预癌性恶病质肌肉萎缩的研究

2.1 保元解毒汤组方依据

2.2保元解毒汤主要药效活性成分及现代药理学研究

2.3 保元解毒汤效用

2.4 保元解毒汤质控分析

2.5癌因性肌管萎缩模型的建立及评价

2.6 保元解毒汤干预癌因性肌管萎缩模型最佳浓度最佳时间研究

2.7 保元解毒汤对癌因性肌管萎缩模型P38MAPK/PGC-1通路的影响

2.8 保元解毒汤对癌因性肌管萎缩模型线粒体功能的影响

2.9 保元解毒汤对恶病质模型小鼠肌肉萎缩的影响

结语

参考文献

附录 主要英文缩略词

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