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【6h】

造血细胞靶向性腺病毒载体及诱导生成iPSC细胞的研究

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前言

第一章 纤维顶球改构的人5型腺病毒对淋巴细胞的高效转染研究

1. 实验材料

1.1 主要仪器及设备

1.2 主要试剂

1.3 主要溶液的配置

2. 实验方法

2.1. 腺病毒质粒的构建

2.2腺病毒的获取

2.3细胞的培养

2.4 统计学分析

3. 实验结果与分析

3.1 纤维修饰的人腺病毒5(HAdV-5)载体的构建

3.2转导造血细胞系

3.3人CD34 +脐带血细胞的转导

3.4原代人T细胞的转导

3.5 T细胞亚群的转导

3.6病毒感染对CD4/CD8 T细胞比例和转基因动态表达的影响

3.7病毒感染对细胞生长的影响

4. 讨论

第二章 血细胞诱导生成iPSC及iPSC分化MSC的培养及鉴定

1. 实验材料

1.1主要仪器及设备

1.2主要试剂

2. 实验方法

2.1 细胞的复苏

2.2 细胞的传代

2.3血液标本的PBMC培养(D0)

2.4病毒载体转染入PBMC细胞(D4)

2.5PBMC转染1d后转板培养(D5)

2.6克隆挑取

2.7细胞冻存

2.8细胞爬片免疫荧光

2.9细胞的诱导分化

3.实验结果

3.1人外周血单个核细胞诱导为iPSC的细胞形态变化过程

3.2多个iPSC克隆的挑取、培养筛选

3.3多个iPSC特异蛋白标记物的免疫荧光表达鉴定

3.4 iPSC诱导分化为MSC的形态对比

4.讨论

全文结论

参考文献

综述:条件复制性腺病毒-Ad5 / F35在肿瘤治疗中的安全性和作用机制

作者简历

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