胆囊癌中fascin蛋白的表达及淋巴结清扫、评估与其预后相关性的研究

摘要

第一部分:Fascin蛋白在胆囊癌中的表达及意义
　　[目的]作为一种肌动蛋白结合蛋白，fascin蛋白在许多人类肿瘤组织中呈高表达，但在多数正常上皮组织中表达阴性。Fascin蛋白在胞突以及细胞内其他机动蛋白相关结构的装配及稳定中起关键作用，其表达能够促进肿瘤细胞丝状伪足及侵袭性伪足的形成，进而促进肿瘤细胞的侵袭及迁移。近来众多的研究数据显示，在许多上皮源性肿瘤中fascin蛋白表达上调，并和肿瘤的预后不良密切相关。Fascin蛋白作为一种和肿瘤侵袭、转移相关的生物标记物已经受到越来越多的关注，但其在人类胆囊癌中的表达还没有系统研究的报道。本研究总结了fascin蛋白在67例胆囊癌标本中的表达特点，研究fascin蛋白的表达与其临床病理特征的相关性，进一步探讨胆囊癌中fascin蛋白的表达与其预后的关系。
　　[方法]本研究收集了67例胆囊癌患者的临床病理资料，运用免疫组织化学方法检测67例胆囊癌患者石蜡切片中fascin蛋白的表达，并运用20例胆囊腺瘤性息肉及息肉附近正常胆囊壁组织作为对照。免疫组化染色阳性细胞数目超过5％为表达阳性。研究分析不同的fascin蛋白表达水平与胆囊癌临床病理资料及预后之间的关系。
　　[结果]67例患者中，fascin蛋白呈阳性表达39例(58.2％)，其中弱阳性表达18例(+，26.9％)，强阳性表达21例(++，31.3％)。通过对比fascin蛋白的表达水平与胆囊癌临床病理资料的关系发现，fascin蛋白的表达水平与胆囊癌肿瘤有无浆膜受侵、有无淋巴结转移及TNM分期密切相关(P＜0.05);与胆囊癌患者的性别、年龄、是否合并胆囊结石、有无远处转移、组织学类型及分化程度均无明显相关性（P＞0.05）。本组67例患者总体中位生存时间为32个月，术后5年生存率20.90％。Fascin蛋白表达阴性的胆囊癌患者手术后中位生存时间为45个月，5年生存率为39.29％;而fascin蛋白表达阳性的胆囊癌患者的术后中位生存时间为19个月，5年生存率为7.69％，其术后生存时间明显低于fascin蛋白阴性表达组（x2=27.301，P＜0.001）。进而fascin蛋白表达弱阳性(+)的胆囊癌患者的术后中位生存时间为28个月，5年生存率为16.67％;fascin蛋白表达强阳性(++)的胆囊癌患者的术后中位生存时间为17个月，5年生存率为0，其术后生存时间明显低于fascin蛋白表达弱阳性(+)组(x2=73.579，P＜0.001)。
　　[结论]Fascin蛋白在正常胆囊上皮组织及腺瘤性息肉组织中无明显表达，在部分胆囊癌组织中表达阳性。Fascin蛋白的表达水平与胆囊癌肿瘤有无浆膜受侵、有无淋巴结转移及TNM分期密切相关，胆囊癌中fascin蛋白的表达上调可能在肿瘤的侵袭及转移中起重要作用。Fascin蛋白在胆囊癌中的高表达提示预后不良，其可以用来作为预测胆囊癌预后的标记物，并可能成为治疗胆囊癌新的靶点。
　　第二部分:根治性淋巴结清扫及评估对胆囊癌预后的影响
　　[目的]探讨胆囊癌淋巴结转移的模式，并对胆囊癌根治手术过程中清扫的淋巴结进行不同的分类评估，进而判断何种评估方式是影响胆囊癌患者预后的最具决定性的因素。
　　[方法]收集了自1995年5月至2010年12月聊城市人民医院收治并经根治性手术治疗的78例胆囊癌患者的临床资料。根治性手术治疗包括同时切除了胆囊原发肿瘤并进行了区域性淋巴结清扫。研究中收集了患者的一般资料、手术资料以及病理学资料。常规对手术切除的每一个淋巴结进行组织病理学检查以判断是否存在转移，每一个患者均记录了手术检出的总淋巴结计数(total lymph node count，TLNC)以及阳性淋巴结计数(positive lymph nodes count，PLNC)，并进而计算淋巴结阳性率(lymph nodes ratio，LNR)。根据术后随访结果记录患者的疾病特异性生存时间(disease-specific survival，DSS)，进而分析不同因素对患者预后的影响。
　　[结果]所有患者均获得随访，中位随访时间26.50个月（平均2～132个月），中位DSS29.00±3.92个月（5年生存率20.51％）。共有37例患者发生淋巴结转移(47.44％)。未发生淋巴结转移患者的术后生存时间明显优于发生淋巴结转移的患者（中位DSS，40个月vs17个月，x2=14.814，P＜0.001）;但是在发生淋巴结转移的患者中，pN1组和pN2组患者相比较，其术后生存时间无显著性差异（中位DSS，18个月vs13个月，x2=0.741，P=0.389）。研究发现，对淋巴结清扫的数量进行评估，其最佳TLNC临界值应为4。将淋巴结阴性组根据TLNC等于4进行分组，TLNC＜4亚组和TLNC≥4亚组相比较，其术后生存时间无显著性差异（中位DSS，37个月vs54个月，x2=0.715，P=0.398）。而将淋巴结阳性组根据TLNC等于4进行分组，TLNC＜4亚组术后生存时间明显低于TLNC≥4亚组（中位DSS，13个月vs21个月，x2=11.035，P＜0.001），进而对于淋巴结阳性组中根据TLNC进行统计学分析，进而发现以TLNC等于6作为临界值更为合理(＜6vs≥6;中位DSS，15个月vs33个月，x2=11.820，P＜0.001)。随着PLNC和LNR的增大，患者DSS逐渐缩短，但是研究没有发现一个确定的临界值。多因素分析显示，患者的组织学分级、TNM分期、TLNC和LNR是影响患者预后的独立因素，阳性淋巴结的部位和PLNC均不是影响患者预后的独立因素。
　　[结论]TLNC和LNR均是胆囊癌根治性切除术后影响患者预后的独立因素。对于淋巴结转移阳性的患者，TLNC最为合理的临界值为6，清扫至少6个淋巴结能够影响患者术后淋巴结分期的质量，并进而影响患者的预后。