巨细胞病毒影响乳鼠海马神经元NMDA受体NR1亚基表达水平的体外实验研究

摘要

目的：
　　 体外研究MCMV对乳鼠海马神经元NMDA受体NR1亚基mRNA表达水平的影响。
　　 方法：
　　 建立乳鼠海马神经元MCMV细胞感染模型：采用小鼠海马神经元无血清原代培养技术，神经元培养8d后随机分为病毒组和对照组，病毒组加入0.1mlCID50为1.7ｘ103/ml的MCMV Smith毒株感染的NIH3T3细胞悬液，正常组加入相同剂量的饲养液，两组均于感染后8h、16h和24h观察并记录细胞病变效应(CPE)，分析MCMV对海马神经元的形态学影响；
　　 采用实时荧光定量PCR(Real-time RT-PCR)的方法检测两组8h、16h、24h海马神经元NMDA受体NR1亚基mRNA表达水平的影响。
　　 结果：
　　 1. MCMV对海马神经元体外发育有明显的细胞病变效应。
　　 2.与对照组比较，病毒组8h、16h、24h三个时相NMDA受体NR1亚基mRNA表达水平均下降，两组Ct值分别为30.6±0.37和35.75±0.096，p=0.0477；28.937±0.064和34.636±1.565，p=0.0016 35.33±0.278和 36.95±1.638，p=0.0271，(均 P<0.05)差异有统计学意义。
　　 3.病毒组内各时相目的基因表达水平呈一定的时间–效应关系，即，随感染时间的延长，表达水平逐渐下降。各时相基因表达水平两两比较F=130.629 p=0.00001。
　　 结论：
　　 MCMV对海马神经元形态学的影响及下调NMDA受体NR1亚基mRNA表达水平。这可能是宫内感染致学习记忆能力下降的分子机制之一。