富硒青钱柳多糖提取及降血糖研究

摘要

青钱柳（Cyclocarya Paliurus(Batal)Ijinskaja）又名摇钱树、青钱李、甜茶树，是双子叶植物纲胡桃科青钱柳属落叶乔木，我国特有的单种属植物，分布于湖北、湖南、江西、广西、贵州等地海拔600~1500米的山区。青钱柳叶富含多糖、黄酮、皂苷等次生代谢产物，研究报道表明青钱柳多糖（Cyclocarya Paliurus(Batal)Ijinskaja Polysaccharide，CPP）具有良好的降血糖活性。硒是人体必需的微量元素，具有抗氧化、提高机体免疫力等功效。本文采用人工叶面喷雾施加有机富硒肥的方式，使青钱柳富集硒元素，提取分离得到富硒青钱柳多糖（Selenium Polysaccharide from Cyclocarya Paliurus(Batal)Ijinskaja，Se-CPP），通过糖尿病模型小鼠比较了Se-CPP与CPP降血糖及抗氧化、免疫调节功效，并对Se-CPP降血糖作用机制进行了初步的探讨。本文开展的主要研究工作如下：
　　（1）通过叶面喷雾对青钱柳施加有机富硒肥，20天后采集富硒青钱柳叶和普通青钱柳叶并干燥处理，采用水提醇沉工艺提取分离获得了Se-CPP和CPP。再以氢化物原子荧光光谱法检测干燥青钱柳叶和Se-CPP、CPP中硒元素含量，结果表明，富硒青钱柳叶中硒元素含量为4.38mg/kg，超过国家富硒茶叶标准（0.25~4.00mg/kg）；Se-CPP、CPP中硒元素含量分别为3.30mg/kg和0.11mg/kg。采用蒽酮-硫酸法检测提取物中多糖含量，Se-CPP和CPP中多糖含量分别为39.5％和37.3%。
　　（2）采用高脂饮食加腹腔注射链脲佐菌霉素诱导建立小鼠糖尿病模型，分别以不同剂量的Se-CPP、CPP、CPP+亚硒酸钠复配物和CPP+硒酵母复配物为受试样品进行灌胃给药，连续给药42天后测定小鼠口服葡萄糖耐量、血清血脂含量、血清抗氧化酶活力、糖尿病小鼠免疫活性。测定结果表明，适宜剂量的Se-CPP可以显著降低糖尿病小鼠餐后血糖、血清总胆固醇含量，提高糖尿病小鼠血清超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活力，增强小鼠免疫力。
　　（3）以阿卡波糖作为阳性对照，分别测定了Se-CPP、CPP、CPP+亚硒酸钠和CPP+硒酵母对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制活性。结果表明，各抑制剂对α-淀粉酶抑制活性强弱次序为：阿卡波糖>Se-CPP>CPP+亚硒酸钠>CPP+硒酵母>CPP；各抑制剂对α-葡萄糖苷酶抑制活性强弱次序为：Se-CPP>CPP+亚硒酸钠>CPP>CPP+硒酵母>阿卡波糖。
　　（4）以盐酸二甲双胍作为阳性对照，测定Se-CPP对HepG2细胞增殖能力和葡萄糖消耗量的影响，并以高糖加高浓度胰岛素诱导HepG2细胞产生胰岛素抵抗（Insulin Resistance，IR），测定Se-CPP对IR-HepG2细胞葡萄糖消耗的影响。结果表明，Se-CPP对HepG2细胞增殖能力无明显影响，但可以显著提高HepG2细胞葡萄糖消耗量，改善HepG2细胞胰岛素抵抗，且效果明显优于CPP、CPP+硒酵母、CPP+亚硒酸钠复配物。
　　富硒青钱柳活性成分的研究目前国内外尚无文献报道，上述研究结果为富硒青钱柳活性成分的研究与产品开发提供重要的实验依据。

目录

声明

1 绪 论

1.1 青钱柳研究概况

1.2 多糖研究概况

1.3 硒元素研究概况

1.4 本文研究目的与意义

1.5 本文主要研究工作

2 富硒青钱柳多糖的提取及多糖含量、硒含量测定

2.1 引言

2.2 实验材料与仪器

2.3 实验方法

2.4 结果与讨论

2.5 本章小结

3 富硒青钱柳多糖对糖尿病小鼠血糖、免疫力的影响

3.1 引言

3.2 实验材料与仪器

3.3 实验方法

3.4 结果与讨论

3.5 本章小结

4 富硒青钱柳多糖降血糖作用机制研究

4.1 引言

4.2 实验材料与仪器

4.3 实验方法

4.4 结果与讨论

4.5 本章小结

5 总结与展望

5.1 全文总结

5.2 展望

致谢

参考文献

附录1 攻读硕士学位期间发表论文情况

附录2 主要缩写词表