声明
缩略词表
序言
第一部分 噬菌体展示肽技术筛选交链孢霉B细胞表位模拟肽
1 实验材料
1.1 主要材料
1.2 主要试剂
1.3 溶液配制
1.4 主要仪器和设备-80℃超低温冰箱
1.5 主要耗材
2 实验方法
2.1宿主菌活化与保存
2.2噬菌体的扩增、滴定及保存
2.3 噬菌体展示肽筛选交链孢霉B细胞表位步骤
2.4 噬菌体滴度
2.5将噬菌体二次筛选，检验噬菌体的结合性和非结合性
2.6目标噬菌体的噬菌体的扩增、提取及测定
2.7 三维结构匹配与线性序列对比
3 实验结果
第二部分 交链孢霉B细胞表位模拟肽疫苗的结合能力
1 实验材料
1.2 主要仪器和设备4℃冰箱
1.3 主要耗材
2 实验方法
2.1使用酶联免疫吸附法测定交链孢霉B细胞表位疫苗与患者血清池IgE的结合能力
2.2 用ImmunoCAP检测模拟表位噬菌体的梯度抑制作用
2.3 检测模拟表位噬菌体对交链孢霉过敏病人外周血中嗜碱性粒细胞的活化抑制作用
3 实验结果
第三部分 交链孢霉致敏小鼠哮喘模型
1 实验材料
1.1 主要试剂
1.2 主要仪器和设备Olympus光学显微镜4℃冰箱
2 实验方法
2.1建立交链孢霉致敏哮喘小鼠模型
2.2小鼠肺功能检测
2.3肺泡灌洗液收集
2.4肺泡灌洗液炎性细胞总数和分类计数
2.6肺组织病理切片的制作
2.7统计方法
3 实验结果
第四部分 交链孢霉变应原B细胞模拟表位疫苗特异性免疫治疗交链孢霉致敏的哮喘小鼠模型
1 实验材料
1.1 主要试剂
1.2 主要仪器和设备
2 实验方法
2.1哮喘小鼠模型建立与干预方案
2.2 小鼠哮喘模型使用模拟表位疫苗治疗后的的检测内容
2.3 统计分析方法
3 实验结果
3.1小鼠血清IgE与模拟表位噬菌体的结合能力
3.2各组小鼠治疗前后激发时的症状比较
3.3 小鼠血清总IgE、交链孢霉特异性IgE、总IgG1、交链孢霉特异性IgG1的表达水平
3.4小鼠肺泡灌洗液细胞因子各组之间的对比
3.5 小鼠肺泡灌洗液中总细胞数，中性粒细胞，嗜酸性粒细胞计数
3.6 肺泡灌洗液中Th1/Th2细胞数比值比较
3.7肺组织病理切片分析结果
讨论
展望
参考文献
综述:过敏性疾病特异性免疫治疗新型疫苗
参考文献
致谢
附录1 攻读博士学位期间发表的论文
附录2 测序结果
