HPLC测定鸡肉中EPA、APL及SQ多残留方法的建立

摘要

兽药(Veterinary Drug)在保证动物健康和提高动物生产性能方面起着重要作用。但是兽药的使用无疑会导致动物体内药物的滞留或蓄积，并以残留的方式进入人体生态系统，导致兽药残留的产生，严重危害人体健康。 食品中兽药残留在国内外已成为一个影响广泛和颇具争议的问题，其与公众的健康息息相关，也直接关系到产业界的经济利益，因此加强对兽药残留监控的研究已成为当务之急。本研究正是基于此，分别研究了盐酸氨丙啉在鸡肉中残留的高效液相色谱检测方法以及乙氧酰胺苯甲酯、盐酸氨丙啉及磺胺喹噁啉在鸡肉中多残留的高效液相色谱检测方法。 1.鸡肉中盐酸氨丙啉残留检测将鸡肉样品匀浆，用乙腈提取后，正己烷液.液分配除去脂肪等杂质，提取液进一步经Waters Oasis HLB固相萃取柱净化。净化中萃取柱经活化后，以5％甲醇作为溶解液，乙腈作为洗脱液洗脱后，流动相溶解进行测定。以Sunfire<'TM>C<,18>(250 mm×4.6 mm，5μm)为色谱柱，检测波长为265nm，流动相为甲醇-5 m mol/L庚烷磺酸钠水溶液(40：60)(每100 mL庚烷磺酸钠含三乙胺0.6 mL，冰醋酸2.4 mL。)，流速1.0 mL/min，柱温30℃。试验中测得盐酸氨丙啉的检测限为0.04μg/g，线性范围在0.05 μg/mL～1.5μg/mL的标准曲线方程为Y=4.12e+004X-4.47e-+-002，相关系数R=0.999907。在空白鸡肉样品中分别添加盐酸氨丙啉对照液制成0.1μg/g、0.2μg/g、0.4μg/g 3个浓度的鸡肉样品，测得平均回收率为82.292％±3.207％，日内变异系数分别为3.79％、2.11％、5.23％；日间变异系数分别为4.74％、3.13％、1.43％。几项指标均符合残留检测要求。结果表明，本文所建高效液相色谱方法简单、快速、可靠，可用于鸡肉中盐酸氨丙啉的测定。 2.鸡肉中乙氧酰胺苯甲酯(EPA)、盐酸氨丙啉(APL)及磺胺喹噁啉(SQ)的多残留检测样品处理中用乙腈作为提取液，正己烷液.液萃取除去酯肪，提取液进一步用Waters Oasis HLB柱净化，萃取柱经活化后，以5 m mol/LNaH<,2>PO<,4>为溶解液，甲醇为洗脱液，洗脱液经氮气吹干后流动相溶解测定。检测波长为270 nm，流动相为甲醇.5mM庚烷磺酸钠水溶液(40：60)(每100 mL庚烷磺酸钠含三乙胺0.6 mL，冰醋酸2.4 mL)，流速1.0 mL/min，柱温30℃，色谱柱为Sunfire<'TM>C<,18>(250 mm×4.6 mm，5μm)。试验中测得3种药物的检测限为0.05μg/g，标准曲线测定中，线性范围在0.05μg/mL～1.5μg/mL浓度范围内，盐酸氨丙啉的标准曲线为Y=4.12e+004x-4.47e+002，相关系数R=0.999907：磺胺喹噁啉的标准曲线为Y=7.77e+004x-1.76e+003，相关系数R=0.999962；乙氧酰胺苯甲酯的标准曲线为Y=8.91e+004x-1.12e+003，相关系数R=0.999967。在空白鸡肉中分别添加盐酸氨丙啉对照液制成0.25μg/g、0.5μg/g、1.0μg/g 3个浓度的鸡肉样品，测得盐酸氨丙啉的平均回收率为78.358％±4.866％，日内变异系数分别为2.970％、0.425％、6.934％，日间变异系数分别为2.930％、2.712％、9.123％；在空白鸡肉中分别添加磺胺喹噁啉对照液制成0.05 μg/g、0.1 μg/g、0.2 μg/g3个浓度的鸡肉样品，测得磺胺喹噁啉的平均回收率为73.291％4-4.975％，日内变异系数分别为7.644％、4.727％、5.452％，日间变异系数分别为10.468％、4.124％、6.528％；在空白鸡肉中分别添加乙氧酰胺苯甲酯对照液制成0.25μg/g、0.5 μg/g、1.0 μg/g 3个浓度的鸡肉样品，测得乙氧酰胺苯甲酯的平均回收率为82.308％±2.416％，日内变异系数分别为2.970％、0.425％、1.013％，日间变异系数分别为5.823％、4.551％、14.155％。结果表明，本研究所建色谱方法能够用于鸡肉中该3种药物残留检测。

目录

文摘

英文文摘

前言

声明

第一章兽药残留研究概况

1.1兽药残留

1.2兽药残留的危害

1.2.1毒性作用

1.2.2诱导耐药菌株

1.2.3变态反应

1.2.4激素样作用

1.2.5环境污染

1.3兽药残留的原因

1.3.1人为方面的原因

1.3.2药物方面的原因

1.4兽药残留监控的理论和技术基础

1.5兽药残留的防治措施

1.5.1根据药物在机体内的消除规律，合理使用兽药

1.5.2建立兽药质量标准体系及监控体系

1.5.3建立健全动物源性食品质量监测体系，加强动物源性食品质量的监督管理工作

1.5.4大力发展集约化畜牧业

1.5.5加强兽药的立法和执行

1.6兽药残留分析方法

1.6.1兽药残留分析的样品处理方法

1.6.2兽药残留分析的测定方法

第二章乙氧酰胺苯甲酯、盐酸氨丙啉及磺胺喹噁啉的理化性质及残留检测研究

2.1乙氧酰胺苯甲酯的理化性质及残留检测研究

2.2盐酸氨丙啉的理化性质及残留检测研究

2.3磺胺喹噁啉的理化性质及残留检测研究

2.4本研究的创新点

第三章固相萃取-HPLC测定鸡肉中盐酸氨丙啉残留方法的建立

3.1材料和方法

3.1.1试验仪器

3.1.2试验试剂

3.1.3试验方法

3.2结果与分析

3.2.1色谱条件的确定

3.2.2样品处理方法的建立

3.2.3标准曲线的绘制

3.2.4回收率的测定

3.2.5精密度的测定

3.2.6检测限

3.3讨论

3.3.1色谱条件的确定

3.3.2样品处理方法的建立

3.3.3分析方法评价

3.3.4影响保留时间的因素

3.4 小结

第四章固相萃取-HPLC测定鸡肉中EPA、APL及SQ多残留方法的建立

4.1材料和方法

4.1.1试验仪器

4.1.2试验试剂

4.1.3试验方法

4.2结果与分析

4.2.1色谱条件的确定

4.2.2 3种药物的色谱行为

4.2.3样品处理方法的建立

4.2.4标准曲线的绘制

4.2.5回收率的测定

4.2.6精密度的测定

4.2.7检测限的确定

4.2.8实际样品分析

4.3讨论

4.3.1色谱条件的确定

4.3.2样品处理方法的建立

4.3.3方法的回收率与精密度

4.3.4线性范围与检测限

4.3.5方法的选择性

4.4小结

结论

参考文献

致谢

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