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丙酮酸高产菌的选育及其发酵条件的研究

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第一章绪论

1.1丙酮酸的理化性质

1.2丙酮酸的用途

1.2.1在生化研究上的应用

1.2.2在日化工业上的应用

1.2.3在食品工业上的应用

1.2.4在医药方面的应用

1.2.5在农用化学品方面的应用

1.2.6其他应用

1.3生产方法

1.3.1化学法

1.3.2生物发酵法

1.3.3酶转化法

1.4市场前景

1.5发酵法生产丙酮酸的研究进展

1.6丙酮酸的代谢途径及发酵机制

1.6.1丙酮酸的代谢途径

1.6.2丙酮酸的发酵机制

1.7代谢控制育种

1.7.1出发菌株的选择

1.7.2高产丙酮酸生产菌选育原理研究进展

1.8发酵条件研究进展

1.8.1培养基的组成

1.8.2溶氧量及供氧方式

1.8.3 pH值的控制

1.9课题立项背景与意义

1.10研究内容

第二章丙酮酸分析方法的研究

2.1引言

2.2材料与方法

2.2.1仪器

2.2.2试剂

2.2.3分离条件

2.2.4样品处理

2.2.5定性方法

2.2.6定量方法

2.3结果与讨论

2.3.1色谱条件的选择

2.3.2丙酮酸回归曲线的绘制

2.3.3回收率的测定

2.3.4重现性实验

2.4小结

第三章丙酮酸高产菌选育的研究

3.1引言

3.2材料

3.2.1出发菌株

3.2.2主要仪器

3.2.3主要试剂

3.2.4相关溶液

3.2.5培养基

3.3实验方法

3.3.1出发菌株的筛选

3.3.2出发菌株的诱变

3.3.3突变株的检出

3.3.4突变株发酵产酸试验

3.3.5传代实验

3.3.6分析方法

3.4结果和讨论

3.4.1出发菌株的筛选

3.4.2致死率曲线的绘制及诱变剂量的选择

3.4.3突变株的检出

3.4.4透明圈/菌落直径比测定

3.4.5摇瓶产酸试验

3.4.6 T.glabrata TGP19的遗传稳定性

3.4.7遗传标记的鉴定及分析

3.5小结

第四章丙酮酸摇瓶发酵条件的研究

4.1引言

4.2材料和方法

4.2.1菌种

4.2.2培养基

4.2.3主要仪器及试剂

4.2.4分析方法

4.2.5实验方法

4.3结果和讨论

4.3.1种子培养基配方的确定

4.3.2初始葡萄糖浓度

4.3.3氮源浓度及最佳C/N比的确定

4.3.4维生素浓度

4.3.5正交实验

4.3.6种龄对发酵的影响

4.3.7接种量对发酵的影响

4.3.8 CaCO3添加时间对发酵的影响

4.3.9装液量对丙酮酸发酵的影响

4.3.10优化条件下的丙酮酸摇瓶发酵结果

4.4小结

第五章5L罐发酵初步研究

5.1引言

5.2材料和方法

5.2.1材料

5.2.2实验方法

5.2.3分析方法

5.3结果和讨论

5.3.1 5L罐分批发酵

5.3.2 5L罐补料分批发酵

5.3.3 5L罐分批发酵与补料分批发酵比较

5.3.4 5L罐发酵与摇瓶发酵产物HPLC检测

5.4小结

第六章总结与展望

参考文献

硕士期间发表论文情况

致谢

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摘要

该文在对丙酮酸发酵机制进行分析的基础上,以代谢控制发酵理论为指导,重点研究了丙酮酸高产菌的选育及其发酵条件.1.建立了发酵液中丙酮酸定性定量测定的高效液相色谱分析方法.确定了高效液相色谱法分析条件.2.诱变选育得到一株丙酮酸高产菌Torulopsis glabrata TGP19.从7株供试菌中选出一株摇瓶发酵丙酮酸产量最高的T.glabrata TG-06菌株.3.研究确定了T.glabrata TGP19摇瓶分批发酵培养基和发酵条件,如种子培养基、发酵培养基和影响丙酮酸发酵的条件.4.对T.glabrata TGP19 5L发酵罐发酵进行了初步研究.在摇瓶单因素实验和5L发酵罐分批发酵实验的基础上,采用以下方法发酵.

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