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对幽门螺杆菌具有拮抗作用的乳杆菌的筛选及其生物学特性

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第一章引言

第二章对幽门螺杆菌具有拮抗作用的乳杆菌的筛选

第三章菌种鉴定和生物学特性研究

第四章抑菌机理的初步研究

第五章抑制幽门螺杆菌功能性动物实验初探

问题与展望

致谢

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摘要

以健康婴儿粪便及光明乳业技术中心保藏菌种为筛选源,利用琼脂块扩散法和孔扩散法筛选得到5株对Hp具有较强抑制作用的乳酸菌,其中J16和库存益生菌株LactobacilluscaseiLC2W的抑菌效果较为明显。 对J16进行了菌种鉴定和生长特性研究。采用传统方法和16SRNA片段分析的方法,确定J16为Bifidobacteriumlongum,其最适培养温度约为37℃;最适生长pH值为6-7;最适接种量为8%;在MRS-broth中4h进入对数生长期,14h左右进入稳定期;J16发酵乳4℃保藏活菌半衰期约为11天;在人工胃液中表现出较好的耐受性;药敏实验表明,J16对24种常用抗生素中16种敏感。 初步探讨了Bifidobacteriumlongum.J16和L.easeiLC2W两株菌对HpSS1的抑菌机理。J16和LC2W的菌体均不具有抑菌能力;二者发酵MRS的上清液对Hp有较强抑制作用,但并非有机酸和H2O2所致;J16的抑菌成分粗提物对胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、热处理不敏感,但经蛋白酶K作用后抑菌作用增强;LC2W的抑菌成分粗提物则对上述处理均不敏感;在酸性pH值范围内(pH1.5-4.0),J16和LC2W发酵乳对Hp的抑菌作用不消失。 采用4周龄C57BL/6小鼠感染模型检验了J16和LC2W在体内对Hp的预防和治疗作用。经过尿素酶反应、Hp菌体培养及病理组织切片检验,结果表明,J16发酵乳具有预防Hp感染的功效;灌胃J16发酵乳(治疗Ⅰ组)和LC2W菌体悬浮乳(治疗Ⅱ组)的感染小鼠,胃内Hp数量始终低于模型对照组,乳酸菌数量高于模型对照组。

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