臭氧在控制玉米真菌毒素污染中的应用

摘要

本文主要针对玉米贮藏中真菌污染问题，初步探讨臭氧处理对易污染玉米的霉菌赭曲霉（Aspergillus ochraceus）和鲜绿青霉（Penicillium viridicatum）生长的影响以及对赭曲霉毒素A(OTA)的降解作用，分析了臭氧处理对贮藏期玉米发芽活性及营养品质的影响。研究结果可为评价臭氧在玉米贮藏中的应用提供基础数据。研究结果如下：
　　 ⑴采用不同浓度的臭氧在不同时间下分别对赭曲霉和鲜绿青霉的菌悬液及菌落进行处理，结果表明，臭氧对赭曲霉和鲜绿青霉有杀灭作用，10g/m3，30g/m3，60g/m3的臭氧分别处理20min，15min和10min就能将6.18logcfu/mL的赭曲霉和6.47logcfu/mL鲜绿青霉完全杀灭。同时30g/m3的臭氧分别处理60min和90min能将赭曲霉菌落和鲜绿青霉菌落上的菌体全部杀灭，并且在25℃下培养的7天内菌体生长依然受到抑制。镜检结果也显示臭氧处理能显著破坏霉菌的菌体形态。
　　 ⑵臭氧降解赭曲霉毒素A(OTA)的研究表明，10g/m3的臭氧处理120min，OTA的降解率为45.7％;30g/m3和60g/m3的臭氧分别处理120min和90min，能将80μg/L的OTA降低至国家规定的5μg/L以下的安全范围，降解率分别为97.6％和98.7％。60g/m3的臭氧处理10h，能将玉米中污染的80μg/kg OTA降低至5μg/kg以下。
　　 ⑶对比臭氧处理前后玉米发芽率及脂肪酸组成的变化，结果表明，低浓度(10g/m3)的臭氧对玉米种子的发芽率没有影响，较高浓度(30g/m3)的臭氧处理5h玉米种子的发芽降低到85％，高浓度(60g/m3)的臭氧处理1h时发芽率降低到85％，处理5h时发芽率为75％。但是臭氧处理对玉米中脂肪酸的组成和含量均没有影响。
　　 ⑷在前期研究基础上，采用一定处理剂量及时问，将臭氧处理应用于玉米的常温贮藏。贮藏两个月后，与未经臭氧处理的玉米比较表明，臭氧在玉米贮藏过程中能有效抑制和去除真菌及真菌毒素的污染，臭氧处理后的玉米各项指标均优于对照组，说明臭氧处理有利于玉米的贮藏及品质的保持。

目录

声明

摘要

1 前言

1.1 玉米贮藏

1.1.1 玉米的营养价值和保健功能

1.1.2 玉米的利用价值

1.1.3 玉米储藏中存在的主要问题

1.1.4 玉米贮藏品质控制指标

1.2 真菌毒素

1.2.1 真菌毒素污染现状及危害

1.2.2 赭曲霉毒素

1.2.3 其他真菌毒素的危害

1.2.4 储粮中真菌毒素的脱毒方法

1.3 臭氧及其应用

1.3.1 臭氧的发现及性质

1.3.2 臭氧的主要生成方法

1.3.3 臭氧的应用机理

1.3.4 臭氧的检测方法

1.3.5 臭氧的应用

1.4 本课题的研究意义

1.5 本课题的研究内容

1.5.1 臭氧处理对霉菌的影响

1.5.2 臭氧处理对赭曲霉毒素A的影响

1.5.3 臭氧处理对玉米品质的影响

1.5.4 臭氧处理在玉米贮藏中的应用

2 材料与方法

2.1 实验材料

2.1.1 试剂与药品

2.1 2 实验材料

2.1.3 实验仪器

2.2 实验方法

2.2.1 臭氧处理装置

2.2.2 霉菌菌种的活化与转接

2.2.3 臭氧处理霉菌

2.2.4 臭氧处理霉菌菌落

2.2.5 霉菌形态观察

2.2.6 OTA的HPLC色谱条件

2.2.7 OTA标准曲线的制作

2.2.8 臭氧处理OTA

2.2.9 OTA的质谱条件

2.2.10 臭氧处理玉米中污染的OTA

2.2.11 玉米中OTA的提取方法

2.2.12 玉米发芽率的测定

2.2.13 玉米油的提取方法

2.2.14 玉米脂肪酸的制备

2.2.15 玉米油脂肪酸的甲酯化

2.2.16 脂肪酸测定的气相色谱条件

2.2.17 玉米脂肪酸值的测定

2.2.18 臭氧处理在玉米贮藏中的应用效果研究

3 结果与讨论

3.1 臭氧处理对霉菌的影响

3.1.1 臭氧处理对赭曲霉的影响

3.1.2 臭氧处理对鲜绿青霉的影响

3.2 臭氧处理对赭曲霉毒素A(OTA)的影响

3.2.1 OTA的液相检测方法

3.2.2 臭氧处理对OTA降解的影响

3.2.3 臭氧处理前后OTA的质谱验证

3.2.4 玉米中OTA的提取

3.2.5 臭氧处理对玉米中污染的OTA的降解效果

3.3 臭氧处理对玉米发芽率的影响

3.4 臭氧处理对玉米脂肪酸的影响

3.4.1 玉米脂肪酸组成成分的测定

3.4.2 臭氧直接作用玉米油产生的影响

3.4.3 臭氧处理玉米对脂肪酸的影响

3.5 臭氧处理在玉米贮藏中的应用

4 结论

5 展望

参考文献

7 攻读硕士学位期间发表论文情况

致谢