红树莓总黄酮的提取、纯化及抗氧化性的研究

摘要

本研究以红树莓为原料进行总黄酮的提取、纯化及抗氧化性能的研究。建立了分光光度法测定红树莓总黄酮，考察了溶剂提取黄酮物质的最佳工艺条件及超声辅助提取的效果，选取了纯化黄酮物质的最佳大孔吸附树脂及研究其吸附解吸性能，并利用溶剂萃取进一步纯化黄酮物质，还对红树莓总黄酮的抗氧化性能做了研究。 结果表明：以芦丁为标准品，采用紫外分光光度法测定红树莓总黄酮。芦丁在0.011-0.066mg/mL的浓度范围内线性关系良好，总黄酮的平均回收率为100.7％，RSD=2.2％。此法简单、快捷、准确，可以用于测定红树莓总黄酮的含量。 采用醇法提取红树莓总黄酮，研究了影响得率的主要因素，采用正交法确定了最佳提取工艺。结果表明，各因素对总黄酮提取的影响次序为：提取温度>料液比>乙醇浓度>提取时间，最佳提取条件是：以70％乙醇溶液为提取剂，料液比为1:16(g：mL)，在80℃下回流提取4h。在此条件下红树莓总黄酮得率为0.152％。超声处理15min植物细胞壁已经基本破碎，继续增加超声处理时间对黄酮物质的得率影响不大。超声辅助提取可以使黄酮物质有效溶出，从而大大提高了其得率。 以树脂对红树莓总黄酮的吸附量和解吸率为考察指标，选用HPDl00、HPD400、D4020、HPD500、X-5、AB-8和S-8七种型号的大孔吸附树脂进行考察。结果表明，AB-8大孔树脂对红树莓黄酮物质的吸附和解吸效果最佳，吸附流速为2BV/h，吸附pH值为3.0，解吸剂为60％7,醇。AB-8大孔吸附树脂对红树莓总黄酮的纯化具有较好的重复使用性能。用乙酸乙酯对树脂纯化后的红树莓总黄酮进一步纯化。经测定，萃取后的黄酮物质纯度可达32.56％，远远高于树脂纯化后的纯度。 利用纯化后的红树莓总黄酮进行了还原能力的测定、抗猪油氧化、清除羟基自由基试验和抗亚油酸氧化试验。结果表明，红树莓总黄酮有较强的还原能力、能有效抑制猪油和亚油酸氧化并能有效清除羟自由基，具有良好的抗氧化能力。

目录

文摘

英文文摘

声明

文献综述

1前言

2材料与方法

2.1材料

2.2仪器与试剂

2.2.1主要仪器

2.2.2主要试剂

2.2.3树脂类型

2.3方法

2.3.1总黄酮含量的测定方法

2.3.2红树莓总黄酮的提取方法

2.3.3红树莓总黄酮的纯化方法

2.3.4红树莓总黄酮抗氧化性能的研究方法

3结果与分析

3.1总黄酮测定方法的建立

3.1.1最佳吸收波长的确定

3.1.2标准曲线的建立

3.1.3精密度试验结果

3.1.4稳定性试验结果

3.1.5重现性试验结果

3.1.6加样回收率试验结果

3.2溶剂提取条件的确定

3.2.1最剂提取溶剂的确定

3.2.2醇浓度对总黄酮得率的影响

3.2.3提取温度对总黄酮得率的影响

3.2.4料液比对总黄酮得率的影响

3.2.5提取时间对总黄酮得率的影响

3.2.6总黄酮最佳提取工艺的确定

3.3超声辅助提取结果

3.4红树莓总黄酮的纯化

3.4.1吸附树脂筛选结果

3.4.2不同流速对红树莓总黄酮吸附率的影响

3.4.3不同pH值对红树莓总黄酮吸附率的影响

3.4.4上样液浓度对红树莓总黄酮吸附率的影响

3.4.5树脂的动态吸附曲线

3.4.6不同乙醇浓度对红树莓总黄酮解吸率的影响

3.4.7动态解吸曲线

3.4.8树脂重复使用次数

3.4.9经AB-8大孔吸附树脂纯化的红树莓总黄酮纯度测定

3.4.10乙酸乙酯纯化

3.5抗氧化试验

3.5.1还原能力的测定

3.5.2抗油脂氧化试验

3.5.3清除羟基自由基试验

3.5.4在亚油酸中抗氧化性的研究

4讨论

4.1红树莓总黄酮含量测定方法的研究

4.1.1分光光度法的测定依据和特点

4.1.2红树莓总黄酮的测定方法

4.2红树莓总黄酮提取条件的研究

4.2.1溶剂提取法

4.2.2超声提取法

4.3红树莓总黄酮纯化工艺的研究

4.3.1大孔树脂纯化法

4.3.2溶剂萃取纯化法

4.4红树莓总黄酮抗氧化性的研究

4.4.1抗氧化、清除自由基作用机理

4.4.2抗氧化性能的研究

5结论

致谢

参考文献

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