血清miRNA定量方法的建立及其在肝相关疾病诊断中的应用

摘要

背景与目的：microRNA(miRNA)是一类长度为20-24个核苷酸的非编码小分子RNA,与靶基因3'端非编码区不完全配对,从而抑制靶基因mRNA的翻译,影响个体发育、细胞凋亡、细胞增殖和分化等生命活动,与肿瘤的发生、转移和耐药等病理进程密切相关。近年来研究发现,血清miRNA符合疾病诊断标志物的要求。miRNA在肝相关疾病中也起到重要作用。本文就血清miRNA在中毒肝损伤、肝细胞癌和乙肝病人中的差异表达进行分析。
　　 方法：采用实时荧光定量PCR技术对101例病人血清样本(分别为正常血清样本、中毒引起肝损伤病人血清、肝细胞癌病人血清和乙肝病人血清)差异表达分析。
　　 结果：首先建立了一个可靠、有效的血清miRNA定量方法。我们发现,与正常血清相比,miR-122在中毒肝损伤病人血清中呈上调趋势,且当ALT＞600 U/L时,miR-122的上调倍数和ALT值之间有较好的相关性。在肝癌病人血清中ALT值和miR-122之间呈现出不规律的变化,且其中10.2％的病人血清中miR-122呈下调趋势。乙肝病人的血清中ALT值和miR-122之间也呈现出不规律的变化,且有38.9％的病人血清中miR-122呈下调趋势。
　　 结论：通过对中毒肝损伤、肝细胞癌和乙肝病人血清中miR-122的研究,提示miR-122在肝脏中发挥重要的作用,并可能参与了相关疾病的发生发展过程。扩展了我们对肝相关疾病生物学机制的了解,为今后肝相关疾病的miRNA靶向治疗提供依据。